微生物快速检测技术与原理.ppt

优点：缩短培养时间，提高灵敏度，适合于菌数较低的可过滤产品使用。 缺点：仪器较昂贵，运行成本比较贵。 基于MPN(最大近似值)原理，实现自动计数 Tempo 将一定浓度的样品稀释液加入定量的专用培养基后，通过充填方式将样品液充填至48孔测试卡后，经适当的培养（细菌总数测定要求37℃培养40h），根据各孔道内细菌的生长状况，由读卡站进行荧光检测，自动读取结果并换算出样品中的目标菌数值。 优点： 自动动化程度高一些。 缺点：主要用于检测菌落总数 耗材成本昂贵 英国DWS公司的Rabit 奥地利Sylab公司的Bactrac4300 日本的DOX Bactrac4300 DWS Rabit Detection Time (DT) 电导率单位 对数期 稳定期 界限值 IDT与样品中的菌数的对数呈线性关系 校准曲线表示菌数对数与IDT的关系 校准时，同时做电化学法和标准方法，将菌数与IDT填入表格中，自动生成标准曲线，并自动计算相关系数及离散度。 Log cfu＝A (DT) + b 优点：检测成本低，检测时间明显缩短。 可用于微生物生长曲线测定，微生物抑菌研究，防腐剂和消毒剂研究等领域。 缺点：仪器较昂贵，定量检测时需要校正曲线。 目前只能检测细菌总数、大肠菌群和大肠杆菌 方法的准确性和检测精度值得考虑 需要专用的电极盒，试剂相对也比较贵 美国的Soleris、Biolumix 法国的BacT/Alert 3D Biolumix 微生物生长导致培养基 pH值发生变化，由光学 检测器检测底部琼脂层 的颜色变化，记录达到 突变点的时间。 培养基内含有颜色指示剂 与阻抗法类似，可以实现快速检测。 缺点：需要购买原厂的预装培养基，应用范围受限制，成本高昂。 与阻抗法类似，可以实现快速检测。 缺点：需要购买原厂的预装培养基，应用范围受限制，成本高昂。 BacT/Alert 3D 主要应用在医院临床的血培养；以及药品和食品等无菌产品的检测 基于微生物生成产生CO2的原理。CO2积累越多，底部的CO2传感器颜色由蓝绿色变浅，由LED发射一束光至底部，探头检测反射光的强度。光强度与微生物数量有一定关系。 优点：用于临床血培养 缺点：耗材太贵，而且含有对环境有害AsCO2 丹麦Foss BactoScan FC 法国AES chemunex Bactiflow 、D-count 可用于非过滤产品 流式计数 : 线性流体 单细胞分析 灵敏的检测头 对微生物进行核酸染色，用流式细胞技术进行计数 FOSS BactoScan FC 优点：速度快(50-150样品/小时) 缺点：死活细胞一起检测，消耗成本较高，仪器比较难保养，灵敏度不够高 适合牛奶企业检测原奶中细菌总数 Chemunex公司将流式细胞技术与活细胞荧光探针标记及激光扫描技术相结合，推出最新一代的速度更快的Bactiflow以及更高端的D-count 和ScanRDI微生物快速检测仪。 其最大的特点是只检测活细胞数，速度比较快。 Enzyme Viability substrate Free fluorochrome Micro-organism Detector Detector Laser Flow Cell 细胞标记 细胞计数 华粤企业集团有限公司 * 成立于1991年，是目前中国最具规模的实验室仪器设备供应商之一。 目前是全球70多个品牌在中国的总代理，分别涉及生物制药、微生物、分子生物、生物细胞、IVF及实验室耗材等领域。 * * * 常规微生物项目：细菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、酵母总数、霉菌总数 致病微生物项目：沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等 微生物检测的发展趋势 快速化 自动化 标准化 全程追溯 快速检测产品不少，但真正使用的企业不多。 原因一：成本的原因。绝大多数快速检测产品来自国外，成本相对偏高，而中国的人力成本相对便宜，对于检测量小的企业，不会考虑快速检测；而对于每天检测量大的企业又担心成本问题。 原因二：技术的原因。虽然市面上有不少微生物快速检测产品，但或多或少都有一定的技术局限性。一方面与样品的加工工艺有关（譬如添加防腐剂等），另外一方面与检测产品的技术原理等有关。 美国EPIC、Celsis、Millipore、PALL 英国DWS Rabit 奥地利Sylab Bactrac 法国 Bact/Alert 3D、Tempo 美国Soleris， Biolumix 法国AES Chemunex Bactiflow、D-count、RDI 日本Dox A