小儿柴芩清解片质量标准研究.docVIP

精品论文 参考文献 小儿柴芩清解片质量标准研究 费晓冬（江苏省启东市中医院 江苏启东 226200） 【中图分类号】R944.4 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085 (2010)04-0265-02 【摘要】 目的 建立小儿柴芩清解片的质量标准。方法 采用薄层色谱法鉴别小儿柴芩清解片中的柴胡、黄芩、金银花、薄荷；高效液相色谱法对制剂中的绿原酸进行定量分析。结果 绿原酸平均回收率为98.98％，RSD＝2.03％(n=6)。结论 所建立之方法可靠、准确、专属性强，可有效地控制小儿柴芩清解片的质量。 【关键词】 小儿柴芩清解片 质量标准 绿原酸 高效液相色谱 薄层色谱 小儿柴芩清解片由小儿柴芩清解颗粒改剂型而来，其提取精制工艺无质的改变。本品在原有标准的基础上按中药新药研究的要求,对制剂中的柴胡、黄芩、金银花、薄荷进行TLC鉴别,对制剂中的绿原酸进行HPLC定量测定,建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。 1 仪器与试药 岛津LC-10A型高效液相色谱仪，天津恒奥公司HT-230A型柱温箱；HW－2000色谱工作站；FA－1104型电子天平；756pc型紫外可见分光光度计。 柴胡、黄芩、金银花、薄荷对照药材均购自安徽亳州药材市场；绿原酸对照品；薄层层析用硅胶G及硅胶H板；纸层析用新华3号层析滤纸；甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。小儿柴芩清解片样品批号为080415，080416，080417，自制。 2 方法与结果 2.1薄层鉴别 2.1.1柴胡的薄层鉴别 吸取对照液、供试液及阴性液三种溶液各5～10mu;l,分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯—乙醇—水（8∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛溶液，于60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，但阴性有干扰。 2.1.2黄芩的薄层鉴别 吸取对照液、供试液及阴性液三种溶液各5～10mu;l,分别点于同一硅胶H薄层板上，以醋酸乙酯—丙酮—甲酸—水（27∶8∶1.5∶3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品溶液色谱中在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，而阴性没有干扰。 2.1.3金银花的鉴别 按处方除去金银花制得金银花的阴性样品，称取适量按供试品处理方法制得阴性对照溶液。呈现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰，证明金银花的存在，而阴性无干扰。 2.1.4薄荷的薄层鉴别 吸取对照液、供试液及阴性液三种溶液各5～10mu;l,分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯—醋酸乙酯（19∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液—乙醇（2∶8）的混合溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品及阴性对照色谱中在与对照药材色谱相应的位置上未显相同颜色的斑点。 2.2含量测定 绿原酸为金银花的主要活性成分，又是本品的主要活性成分之一，具有较强的生理活性，为有效地控制本品质量，保证本品的临床疗效，我们以绿原酸为指标对本品进行了含量测定，并进行了方法学考察。 2.2.1色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）；流动相:乙腈—0.4%磷酸溶液（1∶9）；检测波长:327nm。在上述色谱条件下理论塔板数按绿原酸峰计算不低于1000，出峰时间适当，峰形对称性较好，主峰与各杂质峰分离较好。 2.2.2检测波长的选择 精密称取绿原酸对照品0.1128g，置100ml量瓶中，加50%甲醇溶解并定容，摇匀，精密吸取1ml于100ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为11.28mu;g/ml的溶液，即为供试品溶液，置200nm～400nm波长处扫描。 结果表明:绿原酸对照品溶液在327nm处有最大吸收，参考小儿柴芩清解颗粒含量测定，确定本品含量测定的检测波长为327nm。 2.2.3供试品溶液制备方法考察 2.2.3.1溶剂量考察 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20mu;l，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.2.3.2提取时间考察 照溶剂量考察项下测定方法进行测定，即得（表略）。结果表明:提取时间为20分钟时基本可将粉末中的绿原酸提尽，因此确定供试品溶液制备的提取时间为20分钟。 另外，又进行了线