康莱特对Lewis肺癌凋亡的影响.docVIP

精品论文 参考文献 康莱特对Lewis肺癌凋亡的影响 李晓丽1 姜鹏2 姚如永2 　　（1青岛市崂山区社区卫生服务中心 山东青岛 266021） 　　（2青岛大学医学院附属医院肿瘤中心 山东青岛 266021） 　　【摘要】目的：观察康莱特对Lewis肺癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－３（Caspase-3）和存活素（Survivin）表达的影响。方法：Lewis肺癌细胞，分别加入5，10，15，20mu;l/ml康莱特，测定其生长抑率细胞凋亡及 Caspase-3Survivin和Survivin的表达。结果：康莱特使肺癌细胞增殖抑制，凋亡增加,且 Caspase-3蛋白升高Survivin蛋白降低。结论：康莱特可改变Caspase-3和Survivin来诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。 　　【关键词】康莱特；Lewis肺癌；细胞凋亡 　　【中图分类号】R730.5 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）17-0016-02 　　【Abstract】Objective To investigate effects of kanglaite injection on tumor cellular apoptosis of Lewis pulmonary carcinoma Methods Lewis pulmonary carcinoma cells were prepared and randomly divided into 5 groups equally with different concentrations of kanglaite,cell inhibition rate was detected and apoptosis of Lewis pulmonary carcinoma and level of Caspase-3,Survivin protein expression were examined. Results KLT Produced an obvious inhibition effection on the lewis cell ,It induced the expression of Caspase-3 protein increased the expression of Survivin protein decreased.Conclusion KLT could increase the apoptosis of the carcer cell by changing the expression of Caspase-3 and Survivin. 　　【Key words】Kanglaite; Lewis pulmonary carcinoma; Apoptosis 　　康莱特注射液主要成分为中药薏苡仁的提取物[1][2]，本实验观察康莱特注射液对Lewis肺癌增殖活性、Leweis肺癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－３（Caspase-3）和存活素（Survivin）表达的影响，并探讨其对肺癌细胞的作用机制。 　　1.材料和方法 　　1.1 主要试剂和仪器 　　MTT购自Sigma公司；PCR试剂盒购自大连宝生物技术公司；原位凋亡细胞检测试剂盒购自Roche公司。美国BD公司出品FACSort流式细胞仪。 　　1.2 检测lewis肺癌细胞抑制率 　　荷有lewis肺癌肿瘤的小鼠处死后,分离肿瘤组织,剪碎后经砚磨稀释制成瘤细胞悬液，吸取细胞悬液，接种于新的培养瓶内，继续培养。细胞移入培养板，培养24小时，加分别加入5，10，15，20mu;l/ml 康莱特的培养液200mu;l,各药物设4个平行复孔，空白对照孔加等量生理盐水，分别培养48小时。细胞分组备用。一组分别加入5g/L MTT液20mu;l。继续培养4小时，吸弃上清液，加入DMSO150mu;l终止反应，计算细胞增殖抑制率。 　　1.3 测定细胞凋亡及Caspase-3和Survivin 表达 　　用缓冲液重新悬浮细胞，加入碘化丙锭溶液10mu;l，混均，避光孵育15min，加入PBS 400mu;l,流式细胞仪检测细胞凋亡情况[3]。离心，PBS重悬细胞，加终止液，药物组加入Caspase-3 和 Survivin荧光抗体20mu;l，对照组加入同型Mouse IgG1/IgG1,FITC/PE 20mu;l,冰盒内避光震荡孵育15min，每管加入2mlPBS,离心，加入多聚甲醛重悬，流式细胞仪检测。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS 13.0 for windows 统计