能源甘蔗生产燃料乙醇的发酵工艺优化研究.pdf

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 能源甘蔗生产燃料乙醇的发酵工艺优化 潘琢， 郑穗平， 林 影， 徐日益 (华南理工大学生物科学与工程学院，广州510641) 摘要：以能源甘蔗为原料，”新桥“酵母为发酵菌种，在新鲜蔗汁中进行直接发酵，对氮源添 加和发酵条件进行了研究。实验结果表明，氮源的添加可以改善酵母的生长和发酵情况，使 发酵周期缩短了12h以上f最适接种量为lO％，最适发酵初始pH值为6．5，最适发酵温度为 35C，震荡状态下的发酵可显著缩短发酵周期． 关键词： 前 言 始子20世纪70年代的石油危机引起了世界各国对未来能源短缺问题的普遍关注， 按照当今石油消耗速度及石油储量推测，到21世纪中期石油资源的供给将逐渐萎缩。 为了缓解能源危机，人们纷纷将目光转向了新能源的开发上。其中，酒精作为一种可再 生的清洁能源是石油等化石能源的首选替代品，目前世界2／3的酒精都用做燃料使用， 在巴西和美国，乙醇汽油已经被大范围推广使用[1]。 发酵法生产的酒精纯度高，原料可再生，世界上95％的酒精工业采用发酵法，原料多 为甘蔗，玉米，糖蜜等。其中能源甘蔗是高生物量作物，是世界公认的可再生的生物质能 源作物之一，而美国夏威夷再生能源协会资料表明，能源甘蔗单位面积酒精产量最多c2】。 上世纪70年代开始，巴西实施利用能源甘蔗生产燃料乙醇替代石油的可再生洁净能源 战略，现达到年产甘蔗酒精150亿升以上，全国有1／3的汽车完全使用酒精，目前巴西的 酒精价格为石油价格的50％左右，其代替石油的空间还相当大[3]． 今年上半年，我国原油和成品油的进口量同比增幅均超过15％，而当前国际油价在 每桶70美元以上高位运行。作为一个经济快速发展、石油天然气人均资源量不足世界 平均水平1／lO的发展中大国，中国急需解决能源需求问题。来自国家发改委的信息表 明，掺人10％燃料乙醇的乙醇汽油成为我国能源替代战略的着力点之一，“十一五”期间 我国将加大推进乙醇汽油的力度。黑龙江省率先在我国实施燃料乙醇项目；随后，广东 省投巨资(7亿元)启动了年产50万吨燃料乙醇的项目，广东遂溪特级酒精酿造有限公 司开始实施15万亩能源甘蔗示范基地项目；福建糖业股份有限公司与福建农林大学甘 蔗综合研究所合作实施万亩能源甘蔗示范基地项目；2003年底，广西科委也启动了能源 甘蔗研究项目[1]。 本文采用现在工业生产中正在使用的常规酒精酵母菌株，对以能源甘蔗为原料的酒 精发酵工艺进行优化，着重研究了氮源的添加，接种量，初始pH值，发酵温度和振荡发酵 潘琢等：能源甘蔗生产燃料乙醇的发酵工艺优化 419 状态对酒精发酵的影响。 1 材料与方法 1．1实验主要材料 菌种：由湛江酒精厂提供的“新桥”酵母。 能源甘蔗：由广东甘蔗糖业研究所提供。 1．2培养基 种子培养基：总糖浓度909／L麦芽汁培养基。 1．3实验方法 1．3．1种子培养 摇床转速200rpm培养至酵母菌浓度为108个／ml。 1．3．2酒精发酵 量取100ml能源甘蔗汁至250ml三角瓶内，添加适量氮源后灭菌，以一定接种量接 人种子液，置于恒温培养箱中或摇床中发酵，每6h称量发酵液失重，直至发酵结束，之后 测定发酵液的菌体浓度、残糖和酒精度。 1．4分析方法 1．4．1酒精度的测定 将三角瓶中的发酵成熟醪量取100ml，置于蒸馏烧瓶中，加入100ml的蒸馏水混合， 装冷凝管后加热蒸馏，收集馏出液100ml，用酒精计直接读数嘲。 1．4．2残糖的测定 使用DNS法快速测定‘们。 1．4．3菌体浓度的测定 使用比浊法测定OD。∞。 2 结果与讨论 2．1添加氮源对能源甘蔗酒精发酵的影响 氮源是构成酵母菌体以及酵母合成代谢的重要原料，其存在水平直接关系到酵母合 成代谢。本实验研究了在蔗汁中分别以硫酸铵、硝酸铵、尿素和酵母膏为氮源对发酵的 ’ 影响，取含氮量为0．1％(g／m1)。 结果如图1所示，添加了氮源对酵母的生长有较为明显的促进作用，其中酵母膏和