脂质体作为眼用药物载体及眼部药代动力学研讨.pdfVIP

博士论文:脂质体作为眼用药物载体及眼部药代动力学研究 脂质体作为眼用药物载体及眼部药代动力学研究 博士生:孙考祥 导 师:吴如金 教授 摘 要 眼局部用药是治疗眼科疾病的主要手段之一。多年来，眼用剂型多是溶液 剂，棍悬剂和半固体制剂。这些传统剂型的主要缺点是眼部的生物利用度很低。 因为眼球的运动和鼻泪系统的作用使药物在角膜前停留时间很短，角膜的屏障 作用以及药物本身的理化性质也使药物的跨角膜转运受到限制，通常只有 1- 10%或更少的药物能够进入到眼睛的前房组织 (如房水，虹膜等)，而分配到后 房组织 (晶体，玻璃体等)的药物则更少。因此，滴眼液需多次反复给药，依 赖于药物的 “脉冲输入”来维持眼部组织的药物浓度，这样应用很不方便，特 别是对于眼科手术后的患者。所以研究新型眼部药物载体以改善眼部的吸收， 提高眼部生物利用度是非常必要的。脂质体 (Liposome)是一种很有前途的新 型眼用药物载体。本文以环饱素和双氯酚酸钠为模型药物，对脂质体作为眼用 药物载体的潜力，从以下几个方面进行了研究。 一 脂溶性药物环抱素眼用脂质体的研制 应用均匀设计法对环饱素脂质体的处方和工艺进行优化，得到两种环抱素 脂质体:中性脂质体 (LIP1)和正电荷脂质体 (LIP2)的最优处方和工艺。采 用旋转薄膜一超声法制备，处方分别为 LIPI:大豆磷脂:胆固醇:环抱素 (1:0.3:0.05w/w/w);LIP2:大豆磷脂 :胆固醇:十八胺 :环抱素 (1:0.3:0.05:0.05w/w/w)，水合相 (PBS,pH7.4)的体积为 20m1。制备得到 的脂质体经透射电镜观察，为单室脂质体，双分子膜清晰，均匀，未见药物结 晶和脂质体团聚现象。经粒径分析仪测定，有效粒径分别为 140.9nm (L工P1) 和239.5nm(L工P2)，多分散度分别为0.15和0.21，呈对数正态分布。葡聚糖 凝胶微柱离心法和超速离心法均可有效的分离包封药物和游离药物，适用于环 抱素脂质体包封率的测定。经测定两种环抱素脂质体的包封率均可达到90%以 上。 本方法制得的环抱素脂质体包封率高，粒度分布均匀.粒径较小，呈半透 一 — 一一渔至一 _ 明状态，适合于眼部的局部应用。 二.环袍素眼用脂质体的离体家兔眼角膜的渗透性及眼部刺激性 以环抱素橄榄油溶液为对照制剂，采用离体家兔眼角膜和特制的角膜扩散 装置，对两种环抱素脂质体的角膜渗透性进行了研究。同时还考察了角膜中药 物的摄入量。 结果表明，中性脂质体和正电荷脂质体均可显著增加环抱素的角膜渗透性， 并且角膜中药物的含量均明显高于橄榄油滴眼液。两种脂质体比较，正电荷脂 质体的角膜渗透性和角膜药物的摄取量均高于中性脂质体，但加入十八胺引入 正电荷后对眼部有一定的刺激性。中性电荷脂质体无任何刺激性，环抱素橄榄 油溶液刺激性较大。 脂质体增加角膜渗透性的机理可能是脂质体先摄入角膜上皮，由于脂质体 的两亲性，较容易透过水性的基质层，并释放药物，药物通过被动扩散完成药 物的跨角膜转运。因为在生理PH时，角膜的上皮细胞带负电荷，带正表面电荷 的脂质体靠角膜的静电亲和力，使角膜中药物摄入量增加，从而导致角膜的渗 透性强于中性脂质体。 三.ES卜HPLC-MS法测定家兔眼部各组织中环袍素的研究 为了研究环抱素脂质体在眼部组织的吸收和分布，首次建立了家兔眼部组 织:角膜，房水，虹膜，巩膜，晶体和玻璃体中环抱素的ES工一HPLC-MS测定方 法。采用SymmetryC。柱 (511m,2.1X150mm)，柱温为300C，流动相为甲醇- 水 (90:10,v八)，流速为0.25ml/min，进样量为20v1。质谱采用电喷雾电 离源 (ESI)，选择性离子检测 (SIR):环抱素:m/z1225[M+Na]+;内标物环 抱素D;m/z1239仁M+Na]+。方法学考察表明，不同眼组织中环抱素的回收率 在96.65%-105.52%之间，日内精密度小于7.63%，日间精密度小于 11.22%，最 低检测浓度为 5ng/ml。本方法简便，特异，准确，灵敏度高，适用于环抱素 眼部药代动力学及眼组织分布研究。 四.环袍素脂质体在家兔眼部的吸收 分布及药