黄芩及其单体成分对RU486致流产小鼠Th1Th2型细胞因子的影响.pdfVIP

910 2006学术年会 黄芩及其单体成分对RU486致流产小鼠 Thl／Th2型细胞因子的影响。 王晓丹钟秀会“ 史万玉 张建楼 (河北农业大学动物科技学院，保定071001) 摘要：目的：研究Thl／Th2型细胞因子在流产发生机制中的意义，探讨中药黄苓及其单体成分(黄芩苷、黄芩素)的安胎 子的表达明显升高，与对照组相比差异显著；Th2型细胞因子的含量有所下降，但与对照组比较差异不显著。预先口服黄芩 型细胞因子的含量，使子宫局部Th2／rrhl的比值升高，降低流产率。 关键词：黄芩；米非司酮；流产：Thl／Th2。 早期胚胎丢失，包括胚胎着床失败和着床后短时间内的胚胎吸收，是畜牧兽医界十分关注的领域。 据报道，哺乳动物尤其是反刍家畜妊娠早期的胚胎死亡率较高，绵羊、牛和猪高达25％以上，而马则更高。 此外，在胚胎移植技术中，体外受精一胚胎移植的成功率也只有30％一50％，早期胚胎丢失直接影响家畜 的繁殖、品种的改良及养殖经济效益。因此，研究妊娠早期母胎界面的免疫关系，寻找预防早期胚胎丢失 的措施极为重要。 妊娠是胚胎附植在子宫并在其中生长发育的过程。从“自我与异己(self—nonself 理论”的免疫观点看，机体最基本的免疫功能在于识别和排斥“异己”物质。在妊娠过程中，带有一半父体 抗原的胎儿，对母体是同种半异体移植物，却不被母体的免疫系统所排斥，其机制可能复杂多样并相互影 响。近年免疫学领域Thl／Th2型细胞因子的研究，为探讨胚胎成功着床的免疫学机制开辟了新途径。学 G．Wegnann…对妊娠母鼠外周血淋巴细胞分泌的细胞因子测定后，首次提出妊娠是以Th2型细胞因子为 主的生理现象。Marzi等[21用抗原或有丝分裂原刺激外周血淋巴细胞并检测细胞因子情况，发现正常妊娠 的。因此现在大多数学者认为，正常妊娠应当是以Th2型免疫及其相关因子占优势的Thl／Th2型细胞因 子动态平衡。 中药黄芩安胎，具有悠久的历史。金元时期名医朱丹溪称“黄芩、白术乃安胎圣药”。李时珍《本草纲 目》中介绍，“黄芩，得酒上行，得猪胆汁除肝胆火，得柴胡退寒熟，得芍药治下痢，得桑白皮泻肺火，得白术 安胎。”大量动物实验和现代中药药理学研究已发现中药对妊娠期细胞因子平衡有着重要影响，从而提示 从细胞因子角度进行研究，可能成为研究中药安胎机理和提高中药安胎疗效的突破口。但中药保胎常常 是复方发挥作用，临床上对单味药或单体成分对妊娠期间免疫状态的调节作用研究较少。 ·国家自然科学基金资助(NoNo．3c1571361) 兽医部分 9ll 小鼠子宫局部Thl／Th2型细胞因子的含量，揭示子宫局部Thl／Th2型细胞因子与早期胚胎丢失的关系。 另一方面，探讨黄芩不同成分对小鼠母胎界面免疫状态的影响，从免疫学角度认识中药保胎机理。这不 但可以从细胞和分子水平上阐明黄芩安胎的作用机理，佐证妊娠早期母胎界面局部免疫机制，同时为临 床应用中药防治胚胎丢失提供参考依据。 1材料和方法 1．1试验动物 10周龄清洁级BALB／c小鼠(购于河北医科大学试验动物中心)，常规饲养，自由采食饮水。经适应环 境1周，公母鼠交换垫料，1．2d眼观结合阴道涂片法进行发情鉴定。发情母鼠与公鼠l：1合笼过夜，次 日清晨检出阴栓者定位孕Od。 1．2药品及配制 醇，再加灭菌蒸馏水至150／xg／mL。 黄芩苷，Aldrich产品，用双蒸水配制浓度2．5mg／mL。 黄芩素，Aldrich产品，用双蒸水配制浓度2．5mg／mL。 黄芩煎液，市售黄芩饮片，加常水浸泡lh，水煎2次，合并滤液，蒸发浓缩至每毫升含生药0．59。 1．3动物分组及处理 试验分5组。B、C、D、E组在孕7d时颈后肩胛间皮下注入RU486 0．4mL(0．29／鼠)。A组口服双蒸水0．4mL。所有试鼠均于孕9d颈椎脱臼法处死，剖腹取出子宫。 1．4子宫匀浆及细胞因子的测定 剪除子宫周围系膜脂肪，纵向剖开子宫腔，剥离胎儿、胎膜。剪碎子宫角，加入6倍量含蛋白酶抑制 样品OD值绘制标准曲线，据此标准曲线计算各细胞因子含量。 1．5胚胎吸收(死亡)率和流产率计算 发生吸收(死亡)的胚胎个体小，颜色紫黑，出血坏死，有的已溶化成血团块。解剖镜下观察模糊一