鸡EXFABP基因多态性与脂肪性状的相关研究.pdfVIP

2004学术年会囝鹚 选近等基因池间具有的差异条带，同时AFLP方法可以一次扩增检出至少30个以上条带，有时多 达100个，对差异条带的检出效率也成倍增加。从总体上看，AFLP标记在整个基因组里的分布是 随机的，为了得到更清晰的结果，采用的3+3引物组合，揭示了较多的多态性，同时AFLP技术在 一次PCR反应中所能检测的位点也是最多的，较之其它分子标记技术更能覆盖整个基因组，且技 术本身具有较好的重复性，而且经过荧光标记，不需银染，可迅速而准确地直接从测序仪的胶上找 到所需的特异片段。当根据目标性状合并DNA样品，形成4组近等基因小池时，这些差异条带就 最大可能的与相应的目标性状连锁，即谓之这些性状的候选基因或标记。本研究表明，用AFLP方 法对一个性状分组样本分析，可以较快的找到可能与有关性状位点连锁的分子标记。 高邮鸭的青壳性状是与蛋品质有关的一个优良性状，研究已表明：青壳鸭蛋的蛋壳厚度明显高 于白壳鸭蛋，而且青壳鸭蛋蛋白质营养价值优于白壳鸭蛋。所以青壳性状是进行高邮鸭育种的一个 重要资源，DNA分子标记技术发展上使青壳蛋生产率的提高成为现实。本研究通过重复试验说明 了AFLP技术是稳定可靠的，重复性较强。同时在优化AFLP反应体系时的试验结果表明：在一定 范围内改变扩增反应的模板数量、引物、镁离子、TaqDNA酶浓度，其扩增的DNA图谱并不受影 响。利用引物组合EcoRI+ACT／MseI+CTC扩增出的DNA图谱可以将供试的4个近等基因系全 部区分开，从而可用此AFLP标记来有效地鉴定开产前青壳和白壳性状的差异，以达到早期选育的 目的。这些研究结果无疑丰富了家禽青壳性状基因表达的研究，无疑对促进分子标记辅助选择在家 禽育种中的应用具有不可低估的作用。 参考文献(略) 鸡EX-FABP基因多态性与脂肪性状的相关研究。 李慧锋，付渊，姜润深，杨宁” 中国农业大学动物科技学院，北京100094 摘要：在北京油鸡群体中，用SSCP分析细胞外脂肪酸结合蛋白(EX—FABP)基因的多态性， 变化，是无义突变。并分析该变异对鸡脂肪性状包括腹脂率，肌内脂肪含量，肌闲脂宽，皮下脂 肪厚等的影响。统计分析表明， BB基因型有较低的皮下脂肪厚(P0．05)，AC型有较低的肌内 脂肪含量(P(O．05)。说明这一片段上的变异位点可能是导致脂肪性状产生差异的原因。 过去几十年的家禽育种实践已经取得了相当大的进展，鸡的产蛋、产肉、饲料转化率及其抗病 性都有了很大的提高，然而这种高强度的选择又带来了许多负面的影响。如我国的优质肉鸡育种中， 鸡腹脂含量越来越高的问题。因此，在保持优良肉质和提高生长速度的同时，控制优质肉鸡腹脂大 量沉积就成为当前优质肉鸡选育的重要目标。 +作者简介：李慧锋(1975一)，男，山西，在读博士生，主要从事家禽遗传育种的研究。 educrl ”通讯作者：杨宁，Tel：010e—mail：nyang@cau 270囝2004学术年会 脂肪酸结合蛋白已经在鸡的肝脏、肌肉、小肠、视网膜和脂肪组织中被分离出来。其中 在鸡胚中分离出的细胞外脂肪酸结合蛋白(extracellularacid fatty bindingprotein， EX．FABP)，主要在外周组织中表达，在细胞外的体液和血清中优先结合长链不饱和脂肪酸， 对于甘油三脂的合成和脂肪酸的代谢起着很重要的作用。鸡的EX．FABP基因已经成功地克 隆并测序，其序列全长为5148bp，包括6个外显子，共编码178个氨基酸。本试验以北京 油鸡试验材料，对EX．FABP基因的不同基因型与脂肪性状进行分析研究，期望能找到对脂 肪性状影响较大的单核苷酸突变位点。 1材料与方法 1．1试验动物 本试验选用北京油鸡，12周龄时屠宰，测定屠体重、腹脂率、皮下脂厚、肌问脂肪宽等十几 个性状，并用乙醚抽提法测定肌内脂肪含量。每只鸡翅下静脉采血2ml，ACD抗凝。酚氯仿法提取 DNA，一20℃保存备用。 1．2 PCR扩增 根据已发表鸡的细胞外脂肪酸结合蛋白基因不同外显子序列设计出七对引物，经初步分析后选 出具有多态性的一对。该引物可扩增出第四外显子(exon4)片段及部分内含子，该引物序列