鸡IL1β、IL16基因真核表达质粒对禽流感疫苗的免疫佐剂效应研究.pdfVIP

禽类传染病 成神经氨酸酶的头部。 苷酸和氨基酸序列都高度保守，即使存在着碱基的增添和缺失，但并未造成氨基酸的移码突 离株亲缘关系较进，与韩国，日本，美洲，欧洲。伊朗，巴基斯坦的毒株亲缘关系较远H’5J， 与国内分离株在同一进化分支上，A，Chicke曲unnan／B51，06(H9N2)株属国内流行毒株。 现有的资料显示，中国大陆鸡源许多H9N2分离株的NA蛋白在其茎部的第62、63、64 位点上都有N、V、T 有类似的氨基酸丢失与中国邻近的韩国、巴基斯坦、伊朗鸡源H9N2分离株的NA也没有类似 等多株比较分析，其在第62、63、64位点上也没有3个氨基酸的丢失，说明NA蛋白遗传性较 稳定．至于NA基因多位点突变是否会导致NA蛋白结构与功能的改变以及毒株毒力强弱的变 异，还有待进一步的研究。 参考文献略 鸡IL．1B、IL．16基因真核表达质粒对禽流感疫苗的 免疫佐剂效应研究 张毅2，王红宁1。22’徐永莉2，余协中2． 1．四川大学．‘985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台，四川大擘生命科学学院，四川大学动物疾 病防控生物工程研究中心，成都．6100642．四川农业大学动物科技学院， 雅安四川625014 摘要本研究成功构建了PDNAIL-lp及pDNAlL．16分子佐荆，将两种质粒分别或共同与禽流感疫苗联合 免疫，观察鸡白细胞介素lB．16分子佐剂对H5亚型禽流感灭活疫苗免疲效果的影响．将1日龄非免疫健 (C组)．A1．pDNAlL·l 疫后每7d检测禽流感H5特异性抗体，比较各组试验鸡的体液免疫应答水平．实验结果表明：c组，D组， E组都使HI抗体早于A组和B组(免疫后7d)达到保护水平，c组实验中期和后期HI抗体水平显著提高 并使其堆持在很高的水平(P(0．05)，井使HI抗体滴度提高了2Io业以上．D组实验前期Hl抗体水平迅速 05)．E组HI抗 提高且显著高于对照组(Po．05)，但在免疫中后期的HI抗体水平与对照组差异不显著(P0 体水平在实验中前期(免疫后14d)即接近峰值，显著高于c组与D组(P005)，实验后期一直保持较高 水平．表明鸡IL．1B．Ibl6分子佐剂能显著提高机体对禽流感H5灭活疫苗的体液免疫水平．用流式细胞 仪对cD4+、cD8+厦cD3+T细胞亚群进行了监洲，实验结果表明：c组，D组覆E组实验免疫后外周血 细胞水平与对照组A组和B组无显著差异．表明鸡JLlB、IL．16分子佐剩能显著提高机体cD4+．cD3+T 细胞百分分量．本研究为单独使用或联用pDN灿L1p、pDNAIL-16作为禽流感疫苗分子佐剂提供了科学依 据． 关键词禽流感； 鸡ILlB；鸡IL-16；分子佐剂免疫增强作用 白细胞介素lp(IL·1p)主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等多种细胞被刺激时 K 产生，促进胸腺细胞、T细胞的活化、增殖和分化。1998年，weiningCI】J等首次从用LPS 基因，并由邵卫星等Ijl用于疫苗增强作用研究，结果表明鸡痘病毒表达的鸡IL．1B在一定的 剂量下能够提高机体的细胞免疫从而增强对新城疫Lasota疫苗的免疫效果。白细胞介素16 n盯q和IL·6等细胞因子的合成和释放。鸡IL．16基因的克隆的报道来自于Min．w【41等 活性。目前，鸡IL-16作为疫苗免疫增强剂的研究很少。本研究构建了表达鸡IL-1B和IL．16 630 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 H5灭活疫苗激发的体液和细胞免疫反应的影响。此研究在国内外均未见报道，为两种分子 佐剂作为常规疫苗佐剂及它们的联台应用提供了科学依据。 1材料和方法 1．1实验动物，质粒及试剂 大学动物疾病防控生物工程研究中心提供。非免疫鸡胚，自行孵化。重组禽流感病毒灭活疫 MarkerDL2000，各种限 苗购自哈尔滨维科生物技术开发公司。1铀plusp01ym嗽se、DNA 制性内切酶、T4连接酶、质粒纯化试剂盒、氨苄青霉素、dNTP购自太连宝生物工程有限公 司；胰蛋白陈、酵母提取物为OxID产品；禽流感H5抗原：购自