鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的研究.pdfVIP

2004学术年会 囝。。， 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态 结构和发生学的研究+ 程安春，袁桂萍，汪铭书，周毅，刘菲，韩晓英，郭宇飞，廖永洪， 徐超，文明，贾仁勇，周伟光，陈孝跃 动物疫病与人类健康四川省重点实验室，四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心，四川雅安625014 Enteritis 摘要：应用透射电镜和超薄切片技术对鸭病毒性肠炎病毒(Duck 强毒株在感染成年鸭体内的分布和形态学进行研究，结果表明：感染后12h在脾脏和法氏囊首 先观察到少量的DEV出现，24h后在脾、胸腺和法氏囊以及死亡鸭的肝、肠和胰组织器官中均 观察到具有典型的疱疹病毒粒子及其核衣壳形态的DEV。DEV病毒核衣壳有空心型、致密核心 型、双环型和内壁附有颗粒型四种形态，存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒成熟有两种方式： 一为细胞核内核衣壳在核内获得皮层，通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒；二为核内核衣壳通 过内外核膜进入胞浆，核内和胞浆内的核衣壳在细胞浆中获得皮层，然后在各种质膜上获得囊 膜，最后成熟病毒通过细胞破裂或其他方式释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟， 细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密颗粒、核内微管和中空短管、胞浆包液体等病毒 相关结构。 关键词：鸭病毒性肠炎病毒强毒，人工感染，病毒形态发生 Viral 鸭病毒性肠炎(Duck 电镜技术对DEV的形态发生学研究已有零星报道，但多限于对弱毒的细胞培养和自然发病病例的 研究，缺乏系统性的人工感染强毒病例的病毒形态发生学的研究m2剐。本研究通过人工感染DEV强 毒复制DVE急性病例，对病毒的形态结构和病毒形态发生学以及在体内的分布情况进行研究。 1材料与方法 1．1 1．2 人工感染肌肉接种DEV 以后每隔24h取样，2只，次，直至有鸭发生死亡时停止剖杀而采集死亡鸭组织器官，取其典型病变部位 样品包括：心肌、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、法氏囊、胰腺、大脑、十二指肠。正常鸭组织作对照。 1．3超薄切片制备及电镜观察参照文献【4】制作超薄切片，H．600型透射电镜观察并照相。 2结果 2．1病毒攻击的靶器官和靶细胞 鸭感染12h后在脾脏和法氏囊首先观察到少量的病毒出现，24h后胸腺也开始出现病毒，病毒 的数量逐渐增加，在死亡鸭的肝脏、脾脏、十二指肠、法氏囊、胸腺发现数量极多的病毒存在，胰 ’基金项目：四川杰出青年学科带头人基金后续资助项目(编号：03ZQ026．028) 作者简介：程安春，(1965·)，男，博士，教授，贵州省长顺县人，从事动物传染病和分子微生态研究。 2004学术年会 690囝 腺中仅发现少量细胞中有病毒的存在，其它组织没有观察到病毒。受到感染的细胞主要有网状内皮 细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、肠上皮细胞、肠道平滑肌细胞、纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞， 其它如胰腺外分泌细胞、白细胞、浆细胞、外周血淋巴细胞中偶尔见到病毒的存在。淋巴细胞中成 熟病毒较少，往往在病毒成熟之前凋亡或坏死。而在网状内皮细胞、巨噬细胞、肠上皮细胞、肠道 平滑肌细胞、纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞常可见大量成熟病毒，在血管中偶尔可见游离的成 熟病毒。对照鸭组织中未发现病毒。 2-2病毒的形态特征 病毒核衣壳直径为42—94nm，多为90nm左右，细胞核和细胞浆中都可见许多的核衣壳。在感 染的宿主细胞内DEV有四种类型的核衣壳(图1)：①中空型；②双环型：③内壁附有颗粒型；④致密 核心型。细胞核内四种形态的核衣壳都有，双环型和空心型稍少，多为致密核心型和内壁附有颗粒 型；细胞浆中也有很多致密核心型和空心型核衣壳，未见双环型和内壁附有颗粒型。核内的核衣壳 与包涵体联系紧密。胞浆内的核衣壳则常分布于胞浆致密电子物质或胞浆包涵体周围或内部，常靠 近空泡膜，空泡膜上常见深染致密的月牙形物质附着。在感染宿主细胞的超薄切片中容易观察到处 于不同成熟阶段的病毒，成熟的病毒颗粒呈圆形或椭圆形，常因超薄切片的切面不同呈现出核衣壳偏 心或核衣壳缺失等情形