人参皂苷的基质辅助激光解吸质谱研究.pdfVIP

ACTACHIMICASINICA 化学学报 1998，56，298--301 人参皂苷的基质辅助激光解吸质谱研究 周 雨 宋凤瑞 刘淑莹+ (中国科学院长春应用化学研究所长春130022)’ 李向高 (吉林农业大学中药材学院长春130118) 摘要利用MALDI—TOFMS测定了八种人参皂苷的分子量，并分析了西洋参总皂苷的组成．同 时，进行了灵敏度实验，并探讨了基质及碱金属离子的影响，证明该方法灵敏度高，重复性好，结果 准确．是测定极性小分子分子量的有效方法． 关键词基质辅助激光解吸质谱，人参皂苷，分子量 物中的杂质或用于确定混合物的组成，减少分离时间和样品的消耗．同时，MALDI具有很高 的灵敏度，ng量的样品就能满足需要并可持续相当长的分析时间．由于它在测量大分子分子 量方面的优越性，使人们在一定程度上忽视了它在小分子方面的分析能力，但目前已有文章报 道它在一些小分子化合物(Mw1000)方面的应用∞J． 人参皂苷作为人参药物及保健品中特有的有效成分，具有广泛的实际应用价值．在药物鉴 定和质量检查中，特别是对混合物的分析，找到一种快速、灵敏的检测方法是很重要的．人参皂 质有时难以确定各成分的分子量．本文首次通过基质辅助激光解吸质谱测定了八种人参皂苷， 结果表明，在选择恰当的基质条件下，MALDI是一种很好的测定小分子分子量的方法，结果 准确，准分子离子峰十分突出，基质和噪音峰的干扰小，几乎没有碎片，分子量信息一目了然， 克服了快原子轰击方法的不足．此外该方法对于混合皂苷的分析也取得了满意的结果． 1 实验 1．1仪器 采用N2分子激光器，脉冲持续3ns，波长337 ·女，54岁，博士，研究员，博士生导师 收稿日期：1996—07—16 化学学报 ACTAamMICAsINICA1998 299 单次扫描累加方式，每次累加不少于20次． 1．2材料及试剂 实验中所用的人参皂苷，部分由吉林农业大学和白求恩医科大学提供，部分由作者分离提 纯得到，实验前未再进行处理．所用溶剂：市售优级纯甲醇，吡啶使用前需精制．去离子水、基 质：n一氰基一4一羟基肉桂酸(Q—cyano一4一hydroxycinnamic acid)(DHB)由Biomolecular公司提供． 甲酸(2，5一dihydroxyhbenzoic 1．3样品制备 皂苷中除I垴需用吡啶溶解外，其余皂苷均以甲醇为溶剂．先将皂苷配成0．2mg／mL的 燥，待形成一均匀的晶体薄膜后，进行质谱检测．在样品的制备过程中，皂苷Rh2和R93的样 品在真空中很难结晶，当加人少量NaCl饱和溶液后，晶体薄膜很快形成． 2结果与讨论 2．1人参皂苷检测的灵敏度 以人参皂苷Rb为例说明基质辅助激光 解吸质谱的灵敏．将0．2mg／mL的Rb】溶液 稀释50倍，与DI--IB 1：1混合取lvtL，即2ng ～ (1．8pm01)进行质谱分析，结果如图1所示． 所测分子量为1131．9，与计算值相比误差为 0．027％． 2．2人参皂苷分子量的测定 所用人参皂苷共八种，包括人参二醇型 m／2 的Rbl，Rb3，Rd，I垴，Rh2，人参三醇型的Re， 图1人参皂苷Rbl(1．8pm01)的基质辅助 Rgz，以及伪人参皂苷F11．每种皂苷的重复测 激光解吸质谱图 定次数不少于5次，取5次实验结果的平均 值列于表1． 表1 MALDI测定的人参皂苷分子量及相对误差 *(M+Na)+的分子量；**五次实验的平