GILL苏木精染色液的再改良.docVIP

精品论文 参考文献 GILL苏木精染色液的再改良 彭云吉1 杨 军2 （1怀化市妇幼保健院 湖南怀化 418000；2中南大学湘雅医学院附三医院 湖南长沙 410013） 【摘要】 目的 研究苏木精染色液的最佳配方。方法 通过比较不同苏木精染色液的配方上的差异，从生物化学的角度对原配方加以改良，用常规石蜡切片染色观察其染色效果。结果 改良配方染色效果好，色泽鲜明，对比明显。结论 改良GILL染色液可以弥补原配方的不足，美化组织切片，同时降低制片成本。 【关键词】GILL苏木精 改良 丙三醇 苏木精—伊红染色法是病理学中应用最广泛的染色方法，其中苏木精的配制法因各人使用习惯不同而各有千秋。在即用型苏木精的诸多配方中应用最广泛的便是GILL苏木精。针对该配方的某些不足，又有人先后进行了三次改良[1][2]，但均不同程度的易产生氧化膜和稳定性欠佳，且其中改良的半氧化GILL苏木精染色时间过长，给使用者带来了不便。笔者根据自己多年制片经验，对GILL苏木精配方进行了再改良，基本上弥补了上述苏木精染色液的不足。 1 材料和方法 1.1试剂 苏木精（上海光学试剂厂，批号：040122）；碘酸钠（上海化学试剂公司，批号040515）；硫酸铝（上海化学试剂公司，批号051102）；丙三醇（上海化学试剂公司，批号050812）；冰醋酸（上海化学试剂公司，批号060218）蒸馏水。 1.2标本 系我院常规病理检查标本，切片厚3－5mu;m。 1.3配方 苏木精 2g，丙三醇 250ml，硫酸铝 17.6g，碘酸钠 0.15g，蒸馏水 745ml，冰醋酸 5ml。 1.4配制方法 先用丙三醇充分溶解苏木精，再以蒸馏水（约700毫升）溶解硫酸铝，然后将两液混合，使其充分互溶;将碘酸钠用余下的蒸馏水溶解后加入上述混合液中，充分搅拌，这时可看到混合液由深蓝色逐渐转变成紫红色。染色前加入冰醋酸混匀即可。 2 染色结果 新配制的苏木精染色液染色时间为2－5分钟，细胞核染成蓝色，色泽鲜艳，背景清晰，利于观察。 3 讨论 该染色液的最大优点就是不易形成氧化膜，且染液便于长期保存。比较四种改良GILL苏木精配方，其主要差别在于苏木精的溶媒剂不同。前改良配方中溶解苏木精用的是无水乙醇，而本人的改良配方中用的是粘稠度很大的丙三醇。配制过程中，无水乙醇虽然能很方便的溶解苏木精粉剂，但其挥发性太大，配制的染色液难以长期保存；而丙三醇虽然在溶解苏木精时不如无水乙醇快速，但丙三醇几乎不挥发，且有较强的吸水性，可在染液表面形成保护层，这在一定程度上隔绝了空气与染液的直接接触，从而避免了染液的过度氧化，便于长期保存；而氧化剂（碘酸钠）的剂量减少也正是为了防止过度氧化。有人提出[2]应减半使用碘酸钠，但是，剂量太小又会使染液难以成熟而延长染色时间，故不可盲目减少氧化剂用量；至于配方中媒染剂的差异，主要是为了防止金属阳离子对后续染色的影响。事实上，起媒染作用的只是铝离子，因处于离子状态的色精（红色）只有与铝离子结合才能成为蓝色色精，所以应尽量使配方中的金属阳离子种类减少，以防止阳离子之间电荷相互排斥而影响染色的持久性（即防止褪色）；冰醋酸是一种促染剂（改变染色液的酸碱度）[3]故在染液配制初期，染液染色能力最强，无需加太多助染剂，只有在使用一段时间后染色能力下降时再适时适量加入，但此时染液的染色能力??成强弩之末了，因而，这也往往是要重新配制染液的征兆。 参 考 文 献 [1]龚志锦，詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海科学技术出版社,1998,49. [2]王伯沄，李玉松，黄高昇.病理学技术[M].人民卫生出版社,2000,133－958. [3]于洪藻,李成库.病理标本制作技术[M].白求恩医科大学,1999,95.