HPLC法测定苦参片中苦参碱及氧化苦碱的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定苦参片中苦参碱及氧化苦碱的含量 李德鑫1郑亚玉2靳凤云2 （1.贵阳中医学院2009级研究生 550002；2.贵阳中医学院 550002） 【摘要】目的：建立苦参片中苦参碱、氧化苦参碱的含量测定方法。方法:采用高效液相法,用氨基色谱柱,以乙腈-3%磷酸溶液-无水乙醇(82:9:9)为流动相,检测波长207 nm。结果:苦参碱在(0.1102～1.102ug)、氧化苦参碱在0.1042～1.042mu;g范围内线性关系良好。平均加样回收率为98.84%,RSD=0.92%。结论:该法快速,准确实用,可用于控制苦参片的质量。 【关键词】苦参片；苦参碱；氧化苦参碱；高效液相 【中图分类号】S567【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）12-2204-01 苦参片为部颁标准，标准号WS3-B-1953-95，具有清热燥湿，杀虫的功效。用于湿热蕴蓄下焦所致的痢疾，肠炎，热淋及阴肿阴痒，湿疹，湿疮等。原标准中无含量测定,为了更好地控制产品质量,对本品中苦参碱、氧化苦参碱进行了含量测定方法的研究。 1仪器与试药 高效液相色谱仪（岛津）：输液泵LC-Atvp；紫外检测器SPD-10Avp。 试药：苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号110805-200306), 氧化苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号0708-200004)； 乙腈(色谱纯),水为重蒸水，无水乙醇、甲醇均为分析纯。苦参片样品(批号: 040501、040601、040602)由贵州顺健制药有限公司提供。 2方法与结果 2.1色谱条件 氨基色谱柱(5um，4.6times;200mm)，以乙腈-3%磷酸溶液-无水乙醇（82：9：9）为流动相，检测波长207nm，流速1.0ml/min。理论板数按氧化苦参碱峰计应不低于2000。 2.2对照品溶液的制备 精密称取苦参碱和氧化苦参碱对照品适量，加乙腈-无水乙醇（80：20）溶解，分别制成每1ml含苦参碱和氧化苦参碱0.1mg的溶液，即得。 2.3 检测波长的确定 紫外扫描, 氧化苦参碱对照品在206nm处有最大吸收、苦参碱对照品在207.5 nm处有最大吸收，综合取207nm。 2.4供试品溶液的制备 取本品10片 ，研细，混匀，取0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿20ml，浓氨试液0.5ml，密塞，称定重量，超声处理（功率260W，频率40Hz）45分钟，放冷，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml于水浴上蒸干，残渣用无水乙醇适量溶解并定容至10ml，摇匀，以0.45um微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 2.5 线性关系考察 取苦参碱、氧化苦参碱对照品适量,按对照品溶液的制备方法制成每mL含苦参碱0.02204,0.0551 ,0.1102,0.1653，0.2204和含氧化苦参碱0.02084,0.0521,0.1042,0.1563，0.2084的溶液,分别进样5mu;L测定,测定峰面积,绘制标准曲线，结果表明苦参碱在0.1102～1.102ug范围内线性关系良好,回归方程: y=2E+06X+2421.4 r=0.9999；氧化苦参碱在0.1042～1.042ug范围内线性关系良好范围内线性关系良好,回归方程: y=2E+06X-19484 r=0.9997。 2.6精密度试验 精密吸取同一供试品溶液5ul，重复进样6次，测定峰面积，苦参碱RSD为0.80％、氧化苦参碱RSD为0.46％ 。 2.7重复性试验 取同一批样品(040501)6份 ,测定苦参碱和氧化苦参碱含量。结果RSD=1.22%。 2.8稳定性试验 取同一供试品溶液置室温下分别放置放置0、2、4、6、10、小时测定，结果苦参碱RSD为1.35%,氧化苦参碱RSD为0.64%,表明供试品液在10h内稳定。 2.9加样回收率试验 精密称取已知含量的样品(3.04%)0.15,共6份，分别精密加入苦参碱对照品溶液(0.549mg/ml)5ml、氧化苦参碱对照品溶液（0.537mg/ml）4ml，按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，测定苦参碱、氧化苦参碱的含量,并计算回收率，结果见表1。 表1加样回收试验结果 苦参碱和氧化苦参碱总量的平均回收率为98.84％，RSD＝0