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低浓度NaOH稀释液在ASO、CRP的实验应用与观察
精品论文 参考文献
低浓度NaOH稀释液在ASO、CRP的实验应用与观察
(甘肃省张掖市甘州区医院检验科 甘肃 张掖 734000)
【摘要】 目的:检测用低浓度NaOH稀释液在《微量血测定ASO和CRP》法中对检测ASO、CRP实验的灵敏度和准确性的影响。方法:笔者用常规乳胶法检测ASO、CRP、用低浓度NaOH稀释液取代生理盐水的微量血检测ASO、CRP和免疫散射比浊法测定ASO、CRP做了对比实验和总结,并对微量血检测ASO、CRP所采用样本,末梢全血和血清在试验结果上是否存在差异,做了进一步的对比试验。结果:经过实验证明,利用低浓度NaOH稀释液对ASO、CRP实验提高了阳性检出率和实验准确度,且对样本末梢全血和血清的对比试验结果无影响。
【关键词】抗链球菌溶血素“O”(ASO);C-反应蛋白(CRP);乳胶;稀释液;免疫散射比浊
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)27-0094-01
1.材料与方法
1.1 材料
120名检测ASO、CRP的门诊及住院患者血清及全血。ASO、CRP乳胶试剂。生理盐水和低浓度NaOH稀释液。注:自制低浓度NaOH稀释液配方:称取NaHCO3 4.2g,10%NaOH0.4ml,加蒸溜水至100ml(PH 8.0)。日立7180生化免疫散射比浊法试剂由宁波美康生物科技股份有限公司提供。
1.2 方法
1.2.1常规ASO和CRP的乳胶实验
1.2.1.1 ASO实验 取患者血清100uL加入100uL生理盐水中稀释,混匀,取稀释血清50uL于黑色反应板上,加溶血素“O”1滴,混匀2min,加ASO乳胶试剂1滴,混匀5min,读取结果。
1.2.1.2 CRP实验 取患者血清100uL加入100uL生理盐水中稀释,混匀,取稀释血清50uL于黑色反应板上,加C-反应蛋白缓冲液1滴,混匀,加CRP乳胶试剂1滴,混匀2min,读取结果。
1.2.2以低浓度NaOH稀释液稀释样本的ASO和CRP乳胶实验
1.2.2.1 ASO实验 取患者血清(或全血)40uL加入360uL低浓度NaOH稀释液中稀释,取稀释血清(全血样本需低速离心分离血细胞,取上清液)50uL于黑色反应板上,加溶血素“O”1滴,混匀2min,加ASO乳胶试剂1滴,混匀5min,读取结果。
1.2.2.2 CRP实验 取患者血清(或全血)40uL加入60uL低浓度NaOH稀释液中稀释,取稀释血清(全血样本需低速离心分离血细胞,取上清液)50uL于黑色反应板上,加C-反应蛋白缓冲液1滴,混匀,加CRP乳胶试剂1滴,混匀2min,读取结果。
1.2.3生化免疫散射比浊法
ASO、CRP生化免疫散射比浊实验均按试剂操作说明进行。
2.结果
120例患者三种方法ASO、CRP阳性结果比较
2.1 ASO实验结果
在对120名患者的实验中,120名患者常规乳胶实验阳性率是31.2%,微量血检测实验是37.4%,散射比浊法(按>250U/mL为阳性计算)是40.8%。微量血检测实验比常规乳胶实验阳性率高了6.2%。
2.2 CRP实验结果
在对120名患者的实验中,120名患者常规乳胶实验阳性率是18%,微量血检测实验是29.3%,散射比浊法(按gt;8mg/dL为阳性计算)是35.7%。微量血检测实验比常规乳胶实验阳性率高了11.3%。
3.讨论
3.1 上述三种方法的实验结果可以看出,在提供了一定的离子强度和酸碱度的条件下(由低浓度NaOH稀释液替代生理盐水做样本稀释),具有提高ASO和CRP实验的阳性检出率的效果和增强反应灵敏度的效应。实验证明,选用合适样本稀释液可以提高相关实验的实验效果,提高实验质量。
3.2 微量血检测ASO和CRP实验用低浓度NaOH稀释液可破坏补体酶的活性和使RF因子(IgM)在强碱的作用下发生变性而失活,减少实验干扰因素。并且红细胞在低浓度NaOH稀释液中4h内可保持完好。从而保证了实验质量。
3.3 在实验效率方面,用低浓度NaOH稀释液的实验操作方法简便、快速、有较好的灵敏度与准确性。尤其CRP的检测,采用微量全血,可大大缩短实验结果发出报告时间,为条件不够的基层医院急诊患者(如心梗、脑梗等)提供了一种可靠实验方法。
【参考文献】
[1]潘惠芬,顾文红,赵缜,邓星奇.急诊CRP检测方法的选择与临床应用[J].国际检验医学杂志,2012.33(7):849.
[2]张琛.微量血测定ASO和CRP[J].临床检验杂志,1998,16(3):161.
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