孵育时间对抗HCV SCO值影响分析.docVIP

精品论文 参考文献 孵育时间对抗HCV SCO值影响分析 邓 蕾 李观华（江西省九江市第一人民医院 江西九江 332000） 【中图分类号】R735.7 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)25-0118-01 【摘要】 目的 为了了解孵育时间对抗HCV S/CO值的影响。方法 采用ELISA法，对标本进行抗HCV检测。结果 孵育时间延长可使阳性标本抗HCV S/CO值增高。结论 为了确保检验质量，在采用ELISA法测定抗HCV时，应严格控制孵育时间。 【关键词】 孵育时间 抗HCV S/CO值 ELISA 丙肝是一种认识历史很短、相对较新的病毒，它被发现于1989年，是一种主要经血液传播的疾病。我国约有4000万丙肝患者，丙肝在我国的发病率为0.9%～5.1%[1]。近年来，丙型肝炎的诊断主要是靠日益完善的血液检查来完成的。最简单和常用的检测方法是丙肝病毒抗体的测定。检测结果受多种因素影响，我们现就对孵育时间对抗HCV S/CO值影响进行分析，结果如下。 1 材料与方法 1.1 血清标本 取本实验室日常检测标本90份。 1.2 试剂 厦门英科新创ELISA抗HCV试剂盒，经中国药品生物制品检定所批检合格，在有效期内使用。 1.3 主要仪器 上海科华ST360酶标仪；北京普朗DNX9620洗板机；上海跃进电热恒温箱420-BS。 1.4 方法 检测上述标本，孵育时间分别为15min、20min、25min、30min、35min，其余步骤严格遵守试剂说明书。 （说明书上孵育时间为25min） 2 结果 3 讨论 目前ELISA抗HCV试剂盒多为间接法试剂，其基本原理是将抗原包被于固相载体上，样本中抗体于之结合形成固相抗原-抗体复合物，再与酶标二抗反应，形成固相抗原-抗体-酶标二抗复合物，催化底物显色[2]。 由表可见，阳性标本S/CO值随孵育时间的延长而增高，特别是弱阳性标本，孵育时间太短时，甚至出现假阴性结果。而孵育时间过长时，S/CO值略小于1时，可能会出现假阳性，而略小于3.8时，可能会使S/CO值大于3.8。其可能的机制是：抗原抗体反应是一个特异性结合的过程，需要一定的反应时间。当反应时间过短时，抗原抗体结合不够充分，很多未接合的抗原抗体在洗板时被洗掉，或由于终止液的作用无法继续结合，使S/CO值无法正确反应标本中抗HCV的含量。当反应时间过长时，酶标二抗也可以和无关蛋白形成非特异性结合，使S/CO值相应增大。 随孵育时间的延长，阴性标本的S/CO值变化不大。其原因可能是由于阴性标本中没有相应的抗体，故没有抗原抗体反应的过程。S/CO值变化可能主要是由于非特异性结合引起的。 CDC发布了HCV实验室检验新导则，其宗旨是使实验室报告的结果更可信、更有利用价值，核心在于：（1）推荐使用HCV检验的补充实验，即HCV抗体检验的免疫印迹(RIBA)实验和HCV检验的核酸放大实验（NAT）；（2）仅对HCV抗体酶联免疫吸附试验（ELISA，使用目前美国FDA批准的试剂）筛查阳性，且1le;吸光度值/临界值(S/CO)lt;3.8的样本做补充实验[1]。从本次实验结果可知，孵育时间长短对抗HCVS/CO值有影响，严格控制孵育时间有利于筛查试验的S/CO比值的正确以便少做补充实验，节约大量的资金，达到既减少HCV抗体检验结果报告的假阳性数，又使检验结果的可信度极大提高，同时使结果的解释更加丰富、科学、合理。 参 考 文 献 [1]邢文革，郑怀竞.必须提高丙型肝炎病毒实验室检验结果的可信度.中华肝脏病杂志,2004(03). [2]张国平,王林,郭超群.标本溶血对抗HCV检测结果的影响.当代医学,2008(09).