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《中国癌症毒志》2009年第19卷第10期
No.10
CHINAONCOLOGY2009V01.19 749
双基因干扰对MCF一7细胞基因表达
抑制及细胞凋亡影响的研究
刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红
I匹t/ll泸州医学院医学生物学与遗传学教研室,四川泸州046000
[摘要] 背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶
(hTERT)是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(豫用)对维持端粒长度及端粒稳定性非常重
要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载体单独和联合转染乳腺癌MCF-7细胞后,对两基
因的抑制效率以及对细胞凋亡的影响,探索针对端粒的多基因干扰对乳腺癌基因治疗的可行性。方法:构建
因表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:①转染后48h,与PBS组相比,rAd-hTERT对hTERT基因
TRF2基因表达抑制率约85%,联合干扰与单基因干扰相比,对^陋砌嘟刀淝基因的表达抑制差异无显著性(P
0.05)。②干扰组转染后1~6d均能促进细胞凋亡。单基因干扰组转染后3~5d凋亡最明显,第5天达凋亡
68.5%,第3~6天均维持在较高水平,第6天达77.6%。转染后l~6d,联合干扰细胞凋亡率与单基因干扰细
h后可分别显
或相互抑制作用。②rAd-hTERT和rAd—TRF2均能有效促进MCF一7细胞凋亡,且两者联合干扰效果具有累加效应。
因此利用联合干扰技术靶向抑制端粒酶活性和端粒稳定性相关的多基因的表达能更高效地促进乳腺癌细胞凋
亡,抑制肿瘤细胞的增殖与生长。
[关键词】hTERT;TRF2:RNA干扰; 基因治疗; 肿瘤
中图分类号:R73-36+2文献标识码:A 文章编号:1007—3639(2009)10-0749—06
TRF2
TheinhibitionofhTERTand and cells adenovirus·
gene inducingapoptosisby
expression
mediatedhTERlj,TRF2lRNAinterferenceinMCF.7cellsLIU
Lan.cHENShao—kun.SHUIQing-
of and Medical
lin.ZENGY0ng—qiU.YUHong(DepaFtmentBiologyGenetics.Luzhou
LuzhouSichuan
C011egg 646000,China)
totSHUI in
CorrespondenceOing—lE-mail:shuiql8890163.com
and oftelomeraseandtelomere aretwo
[Abstract] stability
Backgroundpurpose:Highexpression
subunitoftelomerase.TI疆2is
conlinonfeaturesintumorcell,hTERTisacamlytic
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