生物实验：大肠杆菌的分离与培养.pptVIP

实验二 大肠杆菌的分离与培养 实验时间：2011.5.23 实验原理 1 实验器材与药品 2 实验步骤及现象 3 实验结果与分析 4 实验反思与总结 5 1.利用液体培养基可以扩大培养大肠杆菌； 2.利用固体培养基对大肠杆菌进行划线分离、培养，目的是获得单菌落； 3.利用附加抗生素的培养基筛选含有重组DNA的受体细胞。 实验原理 器材：高压灭菌锅，培养皿，恒温水浴锅，恒温培养箱，摇床，酒精灯，涂布器，接种环，移液枪，电子秤，锥形瓶； 药品：LB液体和固体培养基，去离子水，70%酒精，氨苄青霉素，大肠杆菌，含有重组DNA的大肠杆菌。 实验器材与药品 实验步骤及现象 1号 转基因 涂布 3号 混合 涂布 5号 普通 划线 2号 转基因 涂布 4号 混合 涂布 6号 普通 划线 ④用涂布器涂布 i.用酒精灯灼烧涂布棒（靠近涂布端的手柄也要灼烧）静置冷却（以防温度过杀死微生物）。 ii.用移液枪取50μl的大肠杆菌加至培养基上。 1000μl=1ml iii.用涂布棒将其均匀涂布于平板上。 iiii.静置5min，倒置培养于37°C的培养箱中。 ⑤在培养皿壁上写、姓名、实验名称，一天后调查统计各个处理菌落数目。 实验步骤及现象 2.大肠杆菌单克隆的分离与培养 ①设置对照组（6号培养皿）和实验组（5号培养皿）。 ②向实验组培养皿中加入氨