发酵工程菌种保藏.pptVIP

菌种的保藏 （1）菌种保藏的目的及原理 （2）菌种保藏的方法 （3）注意事项 ㈠菌种保藏的目的及原理 菌种保藏是保证生产菌种质量的重要环节，其目的 在于不污染杂菌，使退化和死亡降低到最低限度，尽可 能使菌种保持原来的优良性状。 基本原理：根据菌种的生理、生化特性，人为的创 造条件，使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受到抑 制的休眠状态，以减少菌种的变异。 保藏时一般利用菌种的休眠体（孢子、芽 孢等）并创造有利于休眠状态的环境条件， 如降低培养基营养成分、低温、干燥、缺氧 和添加保护剂等，使菌种的代谢活性处于最低 状态，以达到防止菌种退化、死亡的目的。 ㈡ 常用的保藏方法 1、斜面低温保藏法 将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后， 棉塞部分用油纸包扎好，移至2-8℃的冰箱中保藏。 此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单， 使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、 变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化 学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而 影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。 2、液体石蜡覆盖保藏法 由于培养物表面覆盖液体石蜡后可隔绝空气，因 此降低了微生物菌体的物质代谢，延缓细胞的衰 老，同时也防止培养基水分蒸发，是一种简易的 菌种保藏方法。 此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需 经常移种。缺点是保存时必须直立放置，所占位 置较大，同时也不便携带。 4、悬液保藏法 悬液保藏法的基本原理是寡营养保藏，是将微生物 混悬于不含养分的媒液中加以保藏的方法。 此法适用于大部分的放线菌，酵母菌，霉菌以及肠 道科细菌等，其关键在于试管口必须防水密封，一般可 保藏1年左右。 5、真空冷冻干燥保藏法 此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力 强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，即使对一些很难保 存的致病菌，如脑膜炎球菌与淋病球菌等亦能保存。适用于菌 种长期保存，一般可保存数年至十余年，但设备和操作都比较 复杂。