棉花GhEPSPS基因的原核表达载体的构建及诱导表达.pdfVIP

Cotton l 棉花学报 CottonScience 2014．26(6)：563～568 棉花GhEPSPS基因的原核表达载体的构建及诱导表达 巩元勇1，倪万潮P，帕尔哈提·买买提2，郭书巧1，束红梅1，何林池3 (1．江苏省农业科学院经；齐作物研究所／农业部长江下游棉花和油菜重点实验室，江苏南京210014： 2．国家棉花工程技术研究中心，新疆乌鲁木齐830091；3．江苏沿江地区农业科学研究所，江苏如皋226541) 摘要：目的在于构建棉花GhEPSPS基因的原核表达载体，并在宿主大肠杆菌中成功诱导表达利用RT—PCR I和XhoI酶切位点的 得重组载体pEASY-Blunt．GhEPSPS；以该重组载体为模板，PCR获得两端含有EcoR 究结果表明，成功克隆获得了棉花GhEPSPS基因的CDS序列，并成功构建了该基因的原核表达载体，目的基 因能够在宿主菌中被诱导大量表达。该研究结果将为深入研究棉花EPSPS酶的结构、功能以及酶学特性提供 重要的研究基础，、 关键词：棉花；GhEPSPS基因：原核表达；SDS．PAGE 中图分类号：$562．0l文献标志码：A 文章编号：1002—7807(2014)06—0563—06 Constructionofa VectorandInduced ofCotton ProkaryoticExpression Expression GhEPSPS gene Maimaiti2，Guo Linchi3 GongYuanyon91，NiWancha01，PaerhatiShuqia01，ShuHongmeil，He ofIndustrial ofCottonand of (1．Institute Crops,JiangsuAcadem)ofAgriculturalSciences／KeyLaboratory Rapeseed,Ministry 210014．China；2．ResearchCenterofNationalCotton Agriculture,P．R．China．Nanjing,Jiangsu Sciences RiverBank 830091，China；3．Institute rumqi ofAgriculturalofJiangsuChangjiang District,Rugao，Jiangsu226541， China) ofthis wastoconstructa vectorofcottonGhEPSPS couldbe Abstract：The purposepaper prokaryoticexpression gene，which induced inhostbacteriaE．coilRT—PCRwasusedtoobtainGhEPSPS flame from expression geneopenreading sequenceup— 1 wasclonedto vectorand a