抗人球蛋白实验.pptVIP

? ■ ? ? ? ? ■ ? ? ? ? ■ ? ? ? ? ■ ? ? ? 抗人球蛋白实验 概述 抗人球蛋白实验（AGT）,又称Coombs试验，是不完全抗体的一种很好方法。抗人球蛋白是用人血清免疫家兔，产生的抗人球蛋白抗体，即抗人球蛋白血清。可检测体内致敏的RBC(直接抗人球蛋白实验)和体外致敏的RBC(间接抗人球蛋白试验)。 实验原理 直接抗人球蛋白试验是用抗球蛋白试剂直接和待检RBC进行反应，目的是检测RBC上是否存在免疫球蛋白，该试验是免疫血液学最长用的试验之一。大多免疫抗体为IgG类，分子量小,与RBC相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称为不完全抗体。但在抗-IgG（抗人球蛋白抗体）参与下，通过抗人球蛋白的桥连作用，可使RBC与相应抗体（IgG）反应出现肉眼可见的凝集。 仪器及用具：小试管、吸管、离心机、37℃水浴箱、显微镜、冰箱等。 试剂 （1）抗球蛋白试剂。 抗球蛋白试剂通常有三种：多特异性抗球蛋白试剂（简称：多抗，在直抗试验中常常作为初筛试剂使用）、单特异性抗-IgG试剂（简称：抗-IgG）和单特异性抗-C3试剂（简称：抗- C3）。多抗包括了抗-IgG和抗- C3两种成分，在直抗试验中一旦出现阳性结果，通常需要单抗-IgG和抗- C3进一步分析。 （2）致敏对照RBC：取3人O型RBC混合用生理盐水洗涤，上清液倒