草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白基因植物表达载体的构建.pdfVIP

第39卷第4期 淡水渔业 2009年7月 No．4 Jul．2009 V01．39 FreshwaterFisheries 草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白基因植物表达载体的构建 周 勇1”，范玉顶2，徐进2，李艳秋2，肖 艺1，曾令兵1’2 中国水产科学研究院长江水产研究所，湖北荆州434000) (1．华中农业大学水产学院，武汉430070；2． AF403394)为模板，采用RT—PCR构建了 摘要：以据草鱼呼肠孤病毒(GCRV)VP6蛋白的全基冈序列(GeneBank I 2．1一VP6重组质粒含有Nco 草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白基闪植物表达载体的构建。结果显示：实验构建的pCR 和跆f 2．1．VP6重组质粒经PCR扩增和测序显示含有1．3Kbp的草鱼呼肠孤病毒VP6基因读码 II酶切位点；pCR 酶切、PCR扩增和序列测定显示，pCAMBIAl302-VP6含有1．3Kbp的草鱼呼肠孤病毒VP6基因片段，说明已插 入植物表达载体pCAMBIAl302绿色荧光蛋白基因前，成功构建了融合表达草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白和绿色荧光 蛋白的植物表达载体pCAMBIAl302一VP6。 关键词：草鱼呼肠孤病毒；VP6基因；植物表达载体；构建 中图分类号：$941．41；Q782 文献标识码：A vector Constructionof of plant-basedexpression reovirusVP6 grasscarp gene ZHOU t一，FAN Jin2，LIYan．qiu2，XIAOYil，ZENGLing—bin91，2 Yon91 Yu．din92，XU RiverFisheriesResearch (1．Fisheriesof AgriculturalUniversity，Wuhan430070；2．Yangtze Institute， CollegeHuazhong Chinese 434000) AcademyFisheryS’ciences，Jingzhou，Hubei of of RT-PCRwith b铀edon Abstract：Theregiongrasscarpreovirus(GCRV)VP6gene嘲amplifiedby primers coding invirusinfected the in theviralRNA extracted