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临床微生物标本的采集与送检 郑州市骨科医院检验科 郑岩 201-0-1 临床感染性疾病的诊断和治疗 正确规范的采集和运送标本 临床常见标本类型 呼吸道标本 尿液标本 血液标本 脓液及创伤分泌物标本 粪便标本 穿刺液标本（脑脊液、关节液等） 标本采集原则 采集标本时必须注意无菌操作，使用密闭的无菌容器，避免杂菌污染 采集标本最好能在使用抗生素前采集，以提高阳性率 采集的标本中不得加防腐剂或消毒剂 安全防护 标本容器 呼吸道标本的采集 采集时间： 痰：一般以晨痰为好 采集方法： 自然咳痰法：清水反复漱口后，用力咳出呼吸道深部的痰，将痰液直接吐入无菌容器中，标本量应≥2ml；无痰可用3％-5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 呼吸道标本采集 采集时间： 咽拭标本：无严格时间限制，咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集为宜 尿液标本采集 采集时间：晨起第一次尿液为佳 采集方法： 中段尿采集法：女性：成年女性外阴部先以肥皂水清洗，再以无菌水冲洗，然后排尿弃去前段尿，留取中段尿10ml左右于无菌试管内送检；男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水冲洗，留取中段尿 注意事项： ◆无菌导尿管采集尿液，应在排出15ml尿液后收集标本，但导尿容易引起逆行性感染◆留置导尿管采尿，应先以75%酒精消毒导管口，用无菌注射器收集5-10ml尿，长期留置导尿管患者，应在更换新尿管时留取尿标本 脓肿及分泌物标本采集 封闭性脓肿：消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取脓液注入无菌容器内送检 开放性脓肿和伤口分泌物：无菌盐水或70%乙醇擦去表面渗出物，尽可能抽吸或将拭子深入伤口，用拭子深入溃疡基地部或边缘部，采集两个拭子分别做培养和革兰氏涂片染色 大面创面分泌物：用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物，置无菌容器内送检 穿刺液标本采集 采集时间： 当怀疑感染存在，应尽早采集标本，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集 采集方法： 采用无菌方法用注射器抽取体内可疑感染部位的液体5-10ml ，注入无菌管或血培养瓶内立即送检 粪便标本采集 自然排便采集法：自然排便后，采集脓血、黏液部分2-3g或液体便取絮状物1-2ml,置无菌容器内送检 注意：如排便困难或婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本 标本采集后应尽快送检，室温下不超过2h 血液标本采集 采血时间 采血部位 采血量 采血套数 注意事项 血培养的最佳实践 血培养的概念 采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测. 检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在. 如有细菌,则极有可能为致病的细菌. 进一步进行鉴定/药敏试验. 血流感染与血培养的规范实践 CLSI Principles and Procedures for Blood Culture; Approved Guideline (M47-P,2006) 血培养临床实践指南 怀疑患者有血流感染的症状有： 不明原因的发烧(＞38℃)或体温过低(＜36℃) 白细胞增多（ ＞10,000/ul），粒细胞减少（ ＜1,000ul） 休克，寒颤，僵直 严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，…) 心率异常加快 低血压或高血压 呼吸频率加快 怀疑血流感染或脓毒症时应常规行血培养 问题1：血培养的指征是什么? 0 30 60 时间 (分钟) 体温 血培养采血时机 细菌浓度 问题2：怀疑血流感染，何时采血最佳？ 成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份” 注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。 儿童一般只做需氧培养，特殊患者才考虑厌氧培养 问题3：应该采几份血液标本? Cockerill, CID 2004 血培养套数与阳性检出率（％） 65％ 80％ 96％ 99％ 凝固酶阴性葡萄球菌CNS 医源性感染最常见病原菌； 表皮葡萄球菌感染最常见。 人体正常菌群（皮肤、口腔、小肠）； 属于条件致病菌；引起泌尿系统感染、细菌性心内膜炎、败血症 2－3套血培养，有助于污染的判断。 采血量与检出率的关系 血培养物每增加1毫升，成年人真性菌血症 阳性检出率增加3％ 问题4：应该采集多少血液? 75%乙醇擦拭静脉穿刺部位，等待30秒 1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒，从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm. 用75%乙醇消毒 60秒（脱碘），待酒精挥发干燥后采血. 注