愈胃灵合剂对慢性萎缩性胃炎大鼠胃酸分泌及SS、Bax含量的影响.docVIP

精品论文 参考文献 愈胃灵合剂对慢性萎缩性胃炎大鼠胃酸分泌及SS、Bax含量的影响 乔 虹 娄 华通讯作者 王 昊 曹桂芳 杨宏升 　　郑州市中医院 河南郑州 450007 　　【摘 要】目的：探讨愈胃灵合剂(Yu wei ling mixture YWLM)对慢性萎缩性胃炎大鼠（CAG）胃酸分泌及SS、Bax的影响及机制。方法：将健康Wistar大鼠随机分为5组，即正常组、CAG组、YWLM低、中、高剂量组，每组15只。用水杨酸钠灌胃联合自由饮用氨水法建立大鼠CAG模型，正常组予生理盐水灌胃。造模成功后开始给予药物干预，YWLM按16 g/kg?d、8 g/kg?d、4 g/kg?d的剂量给大鼠连续50天灌服，取材后检测胃液总酸和游离酸含量，采用ELISA法检测血清SS的含量，免疫组化法检测胃粘膜中Bax的表达变化。结果：与正常组比较，CAG组血清SS含量显著升高（Plt;0.01)，胃液总酸、游离酸含量、胃粘膜Bax表达显著降低( P lt; 0. 01; P lt; 0. 01; P lt; 0. 01)；与CAG组比较，YWLM（高、中、低剂量）组血清SS含量明显下降，胃液总酸、游离酸含量、胃粘膜Bax表达升高(Plt;0.01或Plt;0.05)，其中高剂量组差异最为突出(Plt;0.01)。结论：YWLM对CAG大鼠模型有较好的治疗作用，促进胃酸分泌、减少血清SS含量、或上调Bax表达可能是其部分作用机制。 　　【关键词】愈胃灵合剂；慢性萎缩性胃炎；胃酸；SS；Bax 　　【中图分类号】R573.3+2 【文献标识码】B 【文章编号】1674-8999（2015）9-0659-02 　　慢性萎缩性胃炎( chronic atrophic gastritis, CAG )是临床上常见的消化系疾病，以胃黏膜上皮和腺体萎缩、黏膜变薄、黏膜肌层增厚及伴有肠腺化生、不典型增生为主要特征。其发病率、癌变率较高，目前已成为极受医学界重视的疑难杂症。近年来中医药在近年来对该病的基础研究及临床治疗发挥了独特的优势[1-2]。愈胃灵合剂在临床治疗CAG取得了良好的效果，但其作用机理仍不明确。本研究旨在观察YWLM对CAG模型大鼠胃液总酸、游离酸含量、SS含量和Bax表达的影响，探讨其可能的作用机制。 　　1 材料和方法 　　1.1 动 物 　　健康清洁级 Wistar 大鼠75只，雌雄各半，体重180-220g，河南中医学院动物实验中心提供。 　　1.2 实验药物 　　愈胃灵合剂组成：党参、黄芪、白术、丹参、莪术、三七、川芎、白花蛇舌草、石斛、麦冬、半枝莲等组成，由郑州市中医药中药房提供。 　　1.3 试剂及仪器 　　试剂：氨水含NH3 25%～28%（沈阳新兴试剂厂）；水杨酸钠（天津市化学一厂）；兔抗鼠Bax多抗（北京博奥森生物技术公司）；SS与Gas ELISA试剂盒（北京博奥森生物技术公司）；SP试剂盒（美国ZYMED公司）；DAB染色液（美国ZYMED公司）。 　　仪器：高速离心机HHR21型，北京医用离心机厂；电热恒温水浴箱HWS-20型，江苏太仓市实验设备厂；酶标仪Thermo 354型，美国；光学显微镜Olympus BX-51型，日本。 　　1.4 方 法 　　1.4.1 将75只健康Wistar大鼠随机分为5组，即正常组、CAG组、YWLM低剂量组、YWLM中剂量组、YWLM高剂量组，每组15 只。除正常组外各组大鼠采用浓度为2％水杨酸钠溶液按1 mL/100 g灌胃2个月，1次/d，灌胃前后1 h禁食禁水，并自由饮用0．05％ 的氨水，2 d足量喂食，1 d停食；正常组给予1 mL/100 g体重生理盐水日1次灌胃，自由饮水进食，直至实验结束。造模过程中CAG组死亡2只，YWLM低剂量组、YWLM中剂量组各死亡1只，正常组没有死亡。随机抽取2只大鼠做胃黏膜病理组织学检查，确认造模成功后进行药物干预实验，YWLM低剂量2 g生药/ (kg?d )灌胃，相当于人的临床用量，1次/d；YWLM中剂量组4 g生药/ (kg?d )灌胃，相当于人临床用量的2倍，1次/d；YWLM高剂量组8 g生药/ (kg?d )灌胃，相当于人临床用量的4倍，1次/d；CAG组予1 mL /100 g体重生理盐水1次/d灌胃。各组灌胃均50天后，处死所有大鼠。 　　1.4.2 胃液收集检测: 大鼠用乌拉坦(1g/kg) 麻醉后, 仰卧位固定于手术板上, 沿腹正中线剪开, 结扎贲门, 十二指肠剪小口插入引流管, 用洁净注射器抽取胃液, 记录胃液量, 注入离心管离心5min取上清液待测。胃液总酸度和游离酸度测定参考文献[3] :将收集的胃液和胃黏膜冲洗液混合共为4ml，测定其pH 值( pH计) , 然后滴入1