Neuritin真核表达载体的构建及鉴定.pdfVIP

下载本文档

11
0
约1.2万字
约 4页
2018-01-02 发布于广东
举报
版权申诉

Neuritin真核表达载体的构建及鉴定.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

第 29卷第 5期石河子大学学报 (自然科学版) Vo1．29 NO．5 2011年 10月 JournalofShiheziUniversity(NaturalScience) Oct．2O11 文章编号：1007—7383(2011)05—0588—04 Neuritin真核表达载体的构建及鉴定钟晨，罗星，于娜，黄瑾 (新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室／石河子大学医学院，石河子 832002) 摘要：Neuritin(CPG15)是一种神经营养因子，能促进神经突起生长，为了探讨 Neuritin可能的作用机制，本研究构建了人类 neuritin基因的真核表达载体。采用PCR技术扩增编码人 neuritin基因cDNA全长序列，并纯化回收，酶切、连接人真核表达载体 pcDNA3．1(一)A 中，转化大肠杆菌DH5a，挑取阳性克隆pcDNA3．1(一)Aneuritin扩增后，提取质粒，进行双酶切鉴定以及DNA测序鉴定。结果显示，构建的重组质粒 pcDNA3．1(一)A—neuritin含有 45Obpneuritin片段，且重组质粒所含的 neuritin读框片段与GenBankNM 016588．2序列同源性 100 。由此可知：成功构建了peDNA3．1(一)A-neuritin真核表达载体，为进一步研究该基因的功能及作用机制奠定良好的实验基础。关键词：pcDNA3．1(一)A；neuritin基因；真核表达载体中图分类号：Q593．2 文献标识码：A ConstructionandIdentificationofEukaryoticExpressionVectorofNeuritin ZHONG Chen，LU()Xin，YU Na，HUANGJin (KeyLaboratoryofXinjiangEndemicandEthnicDiseases／MedicalCollege，ShiheziUniversity．Shihezi832002，China) Abstract：Neuritin (CPG15)isaneurotrophicfactorthatcanpromoteneuritegrowth．Inordertoexplorepossible1-fleehamsrns)(f Neuritin，weconstructedtheeukaryoticexpressionvectorofhumanNeuritininthisstudy．Encodingfull—lengthcI)NA gonese quencesofhumanneuritinwasamplifiedbyPCR，then thiseDNA fragmentwasdigestedandligatedintOpc1)NA3 ． 1()A of theeukaryoticexpressionvector．TheconstructstransformedintoE．coliDH5aandpositivecloneswerepickedbypcDNA3 ． 1 (一)A～neuritinPCR amplification．Thisconstructwasconfirmedbythedouble—enzymedigestionandI)NA sequencing