猪圆环病毒2型感染后PBMCs中IL2 mRNA的动态变化研究.pdfVIP

2004学术年会 866囝 mRNA 猪圆环病毒2型感染后PBMCs中IL一2 的动态变化8 司兴奎，何芳，周双海，郑洁，郭鑫，陈艳红，杨汉春” 中国农业大学动物医学院，北京100094 摘要：通过RT—PCR技术从猪外周血单核细胞(PBMCs)中扩增和克隆了猪细胞因子IL一2 338bp 的pGEMT．d几2 Joxl05倍系列 稀释倍数pGEMT，IL2质粒的分子个数的对数值为横坐标建立了直线回归方程，其相关系数为0．95。 42天PBMCs中几一2cDNA变化的分析结果表明，感染后2l天IL一2cDNA上升，至28天出现峰 值，至35天基本回复到初始水平，而后进一步攀升至42天，且攻毒组同对照组在感染后14和2l 天几一2cDNA水平经t试验分析结果表明差异极显著(PO．01)。 关键词：猪圆环病毒2型；IL一2；定量竞争PCR；动态变化 circovirus 猪圆环病毒2型(porcine2，PCV2)感染主要引起猪断奶后多系统衰竭综合征 (post—weaningm／．tLtisystemicwasting dermatitis syndrome，PMWS)、猪皮炎与。肾病综合征(porcine and tremors，CT)及母猪繁殖障碍、 nephropathysyndrome，PDNS)、仔猪的先天性阵颤(congenital 仔猪腹泻等疫病，是新近发现的一种传染病”J。自1991年，在加拿大首次暴发PMWS以来已传遍 世界各地，我国学者从具有PMWS流行病学特征、临床症状和病理变化的自然病例中也分离到 PCV2病毒，并用建立的PCR方法对我国北京、天津、河北、山东、山西、深圳、广东等省(市) 的12个规模化猪场进行流行病学调查，结果表明我国PCV2感染情况相当严重，已对我国的养猪 业造成严重的威胁”oJ。本研究通过定量竞争PCR方法，对PCV2感染后外周血单核淋巴细胞 bloodmononuclear (peripheral cells，PBMCs)中IL一2mRNA的变化进行检测，以期从转录水平反 映机体对PCV2的免疫应答情况，分析PCV2感染对IL一2mRNA转录的影响，为深入阐明PCV2 致病机理奠定基础。 1材料和方法 1．1材料 1．1．1病毒和细胞：PCV2BF株由本实验室分离保存：PKl5购自中国兽医药品监察所。 4基金项目：教育部跨世纪人才基金项目。 作者简介：司兴奎，男，3l岁，中国农业大学预防兽医学在读博士生，研究方向为动物分子病毒学与免疫学。 edu．cn ¨通讯作者：杨汉春，教授，博士生导师，yanghanchunl@cau 867 2004学术年会0 eDNA竞争质粒由本实验室构建； 1．1．3质粒与菌株：pGEMT—IL2质粒及缺失92bp的pGEMT-dlL2 E．coliDH5ct工程菌购自Promega公司。 1．1．4引物：扩增IL--2(扩增产物为338bp)}11 upper 7 7 7 5