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第四章 生物分析化学 4.1 慨述 4.1.1 任务与作用 以分析化学理论、技术和方法为基础 以生物化学和分子生物学理论技术为补充 以数学、物理学和计算机技术为手段 三个主要任务： 生物分析化学的独特内涵 4.1.2 分类 物质种类繁多，研究内容极其丰富； 可按 分析方法和功能分类； 分析方法：化学分析、仪器分析； 功能分类：分离分析、结构分析和定量分析 分离分析是指将复杂的生物体内物质分离成 单一组分或组组分的一类方法，它主要包括电 泳（毛细管电泳、二维凝胶电泳和微控芯片电 泳等）、色谱技术等。 特点是综合多种技术手段将分离与分析有机 地结合在一起，提高工作效率。 2. 结构分析： 生物物质结构复杂，且结构决定其特有的 性质和功能。 研究生物物质结构和构象的方法很多，总体上分 为两大类：一类是测定溶液状态下的分子构象，如核 磁共振、圆二色谱、激光拉曼光谱、荧光光谱、紫外 光谱等波谱分析法；另一类是测定分子的晶体结构， 如x-射线衍射分析法和小角中子衍射法。 3. 定量分析：生物分析化学研究的基本任务是确定生物物质的含量。 其特点： 4.4 生物活性小分子分析 生物活性小分子是具有维持机体正常功能、 调节生命活动过程的化学物质的总称； 部分生物活性小分子及功能 4.4.1 一氧化氮分析 一氧化氮是机体内一种作用独特的信号分 子，在不同的器官、不同生理或病理状态下均 存在着利与弊的双重影响。 目前，检测NO的方法有光化学（紫外可见分 光光度法、荧光法、化学发光）、电化学法、 电子自旋共振法和生物检测法。 4.4.2 儿茶酚胺类神经递质分析 儿茶酚胺类（catecholamines,CAs）是络氨酸衍生 物的总称，包括多巴、多巴胺、肾上腺素、去甲肾上 腺素和5-羟色胺等物质。CAs类物质是人体一类重要的 神经递质和激素，对心血管、神经等组织系统的生理 活动起着调控作用，与一些功能性疾病以及器质性的 病变有密切关系。 研究这类物质的分析方法，对于了解他们在生命体内的调控 机制以及相关的药理学研究和疾病诊断均具有十分重要的意 义。 4.4.3 兴奋剂检测（doping control） 兴奋剂是IOC 和其他国际体育组织所确定 的禁用药物（滥用药物，doping），运动员 以非正常量服用这些药物后可以在某种程度 上提高他们的竞赛能力。从本质上讲，兴奋 剂是一类对人体生理机能有重要影响的刺激 性药物，是一类特殊的生物活性小分子。 ? 作用于神经系统以增强体力的刺激剂，如苯丙胺、麻黄碱、咖啡因、可卡因等42种； 能产生快感和心理亢奋而降低痛感的麻醉剂，该类药物多有成瘾性，如哌替啶、吗啡等19种； 具有镇静作用而抑制支气管及血管平滑肌舒张的β-阻断剂，如比索洛尔、梭达罗等9种； 用以增加肾脏对尿的排泄速率使禁用药物在尿液中不易检出的利尿剂，如依他尼酸、苄氟噻嗪米等15种； 5. 用以遮蔽检测重要性生理指标的掩蔽剂，如表睾酮等4种； 6. 用以增长肌肉和逆转蛋白损失的合成类固醇，常见的有氯睾酮、达那唑、大力补、美雄酮等16种雄性激素衍生物； 7. 增强体内红细胞数目并提高血液载氧能力的肽类激素（内源性），包括红细胞生成素（EPO）、绒毛膜促性腺激素（HCG）、生长激素、促肾上腺皮质激素等4种。 2、兴奋剂检测的一般技术 兴奋剂样品时一个复杂体系，它不仅存在正 常食物引入的化学/生物物质和嫌疑外源性违禁 物，同时也含有人体正常生理过程的分泌/代谢 产物-内源性物质。因此，兴奋剂样品分离效 率、监测方法的灵敏度是影响检测结果可靠性 的关键因素。 分离方法 主要依靠色谱法： GC、TLC、HPLC和MEKC。 检测器 兴奋剂的浓度很低，检测器的灵敏度是重 要依据。色谱法中先后采用氢焰离子化检测器 （FID）、氮磷检测器（NPD）和质谱检测技 术。 GC-MS一直是IOC进行兴奋剂检测的最有力工 具之一。目前普遍采用质谱-质谱联用（MS/MS）、 高分辨质谱（HRMS）和多离子检测等技术。这 些方法成功检测2ng/ml的康力龙、克伦特罗、 5β-4-羟基甲睾等兴奋剂。 3、内源性激素的检测与策略 T的检测 EPO的检测 第23页 第24页 第25页 第26页 刺激剂、合成类固醇、β-阻断剂等传统兴 奋剂检测方法已近完善，但一些内源性激素成 为兴奋剂检测的难点。如睾酮（T）、双氢睾酮 （DHT）、EPO和人体生长激素（HGH）等。 第27页 正常男性体内，内源T与表睾酮（ET）的比 为30，而尿中排出的T/ET为1； 如使用外源性T，