遗传学实验——微核.docVIP

本科生课程论文 实验名称 紫外线对大蒜根尖细胞的影响 张礼春 谭志刚 2010506044 杨新 2010506062 所在院系 生命科学学院 专业班级 2010级(1)班 指导教师 日期 201年1月日 紫外线对大蒜根尖细胞的影响 以大蒜根尖分生区为材料，研究了紫外线对大蒜根尖分生区正在有丝分裂细胞的致畸效应。结果表明，紫外线可使细胞核发生结构变异，在分裂间期出现微核、多核现象，分别在紫外线照射5 min、25min、45min和65min 时观察各种畸变类型，且畸变率随着照射时间的加长而增高。微核；紫外线；大蒜； 引言： 细胞核畸变指细胞核形状大小以及核中染色体结构或数目的改变，在显微镜下可以观察和识别。物理因素和化学因素都能诱发细胞核发生畸变，其中诱发细胞核最明显的畸变是细胞核呈微核和多核。微核（icronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是在细胞有丝分裂间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的微核测试辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面 大蒜是研究微核的很好材料，大蒜在室温下3~5 天即可生根，根尖生长速度一致且生根较多。因此，在本研究中使用紫外线作为诱变剂，观察其对大蒜根尖分生区细胞核的影响。选取个体较大，健壮无病虫害的大蒜，剥去老皮，放置于培养皿中，加蒸馏水浸没基部，每天换水2 次，室温下培养培养4天，直到根尖长到 1.0cm~2.0cm 左右。在上午11~12 时左右时，将大蒜及其根尖向上置于超净工作台上，用普通灭菌台中紫外灯进行照射，分别照射5 min、25min、45min和65min。剪下根尖立即投入卡诺氏固定液中处理24 h ，再放置于95% 、80%的乙醇中依次脱水，最后换70%的乙醇，在冰箱内4°C保存。用蒸馏水冲洗保存的根尖 2 次后，将根尖用1N盐酸放入恒温箱解离 10~15 min，然后用蒸馏水漂洗2次，切取根尖分生区置于载玻片上，加改良苯酚品红溶液，同时用镊子捣碎。染色10~15 min ，进行常规压片。每个处理至少观察3个根尖，每个根尖至少观察1 00个左右细胞。用显微镜摄像系统拍摄，观察细胞核畸变类型及统计在一个视野中的微核数目。 2 结果与分析 紫外线照射对分裂期的影响结果1．当照射 min时，细胞都处于正常状态当照射时间增加至min时，和 min 处理相比，当照射时间继续延长至5 min ，比2 min 处理约增加1倍，此时，类型非常容易观察，轻轻挪动显微镜视野，很快就会找到各种畸变照射min时，此时染色体分裂紊乱，出现多级分裂现象 3 讨论 图（1） 图（2） 图（3） 图（4） 参考文献