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细胞生物实验:微核实验
实验原理 微核是染色体断裂后由遗留下来的无着丝粒片断演化而来的次核,其直径通常为红细胞的1/20~1/5,在骨髓和外周血液的各类型细胞中均可见到,但在有核细胞中,微核常难以与核叶 相鉴别,而在嗜多染红细胞中,因主核已排除,若有微核发生则非常容易辨认。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核自发率很低(1~3‰),但在致变剂 的作用下,微核发生率可明显增高,因而微核试验是检测致畸因子的有效的手段。 实验器材 离心机,显微镜,擦镜纸,二甲苯,香柏油,手术剪,手术镊子,刻度离心管,1ml注射器,Giemsa染色液,75%酒精纱布块,甲醇,生理盐水。 实验内容和方法 1.骨髓细胞液制备:取小鼠股骨,剔净肌肉制备骨髓细胞悬液。 2.离心:1000r/min离心5分钟。 3.涂片 4.甲醇固定5分钟 5.染色:Giemsa染液中染色10分钟。 6.显微镜观察 作业与思考 1.画一个具有微核的嗜多染红细胞。 2.计算出平均微核率,并与自发微核率(1~3‰)比较,说明微核增加的原因。 * * 小鼠骨髓嗜多染红细胞 微核试验 实验目的 通过对用已知诱变剂(环磷酰胺)处理的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的测定,初步掌握微核试验的方法和制片技术。
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