木霉REMI突变株主要生防酶活性改变及其基因部分序列差异的研讨.pdfVIP

艋扬铱 2013，39(1)：14—02 PlantProtection 木霉RF3l／l突变株主要生防酶活性改变 及其基因部分序列差异的研究 刘 限 ， 孙淑清 ， 高增贵 ， 黄 哲 (1．沈阳农业大学生物科学技术学院，沈阳 110866；2．沈阳农业大学植物保护学院植物免疫研究所 ，沈阳 110866) 摘要 本文探讨了来源于同一出发菌株木霉T21的不同木霉REMI突变株的主要生防酶活性的改变及其基因部 分序列的差异，利用生化技术测定了木霉几丁质酶和81，3葡聚糖酶酶活性，并对这两种酶的基因部分序列进行 了 分析 。结果表明，木霉REMI突变株几丁质酶和8—1，3一葡聚糖酶活性变化较大；相对于出发菌株T21，菌株 Ttrm68 和Ttrm31酶活性极显著高于出发菌株 T21，而Ttrm94则极显著低于T21。采用简并引物克隆几丁质酶和B一1，3一 葡聚糖酶基因的部分序列，发现菌株Ttrm68、Ttrm31在几丁质酶基 因中插入了GGTATCGATATcGAC片段，菌 株Ttrm94在G一1，3一葡聚糖酶基因中插入 了GTC片段。 关键词 木霉REMI突变株 ； 生防酶； 活性改变； 基因序列差异 中图分类号： S482．292 文献标识码： A DOI： 10．3969／j．issn．0529—1542．2013．01．003 Changeinmainbiocontrolenzymesanddifferenceinthegene partialsequencesoftheTrichodermaREMIstrains LiuXian ， SunShuqing ， GaoZenggui， HuangZhe (1．CollegeofBioscienceandTechnology，Shenyang 110866，China；2．CollegeofPlant Protection，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang 110866，China) Abstract Theactivitiesofchitinaseandp一1，3-glucanaseoftheTrichodermaREMIstrains，constructedfromthe wildstrainT21byrestrictionenzyme—mediatedintegration，andtheirgenepartialsequenceswereclonedandana- lyzedinordertoinvestigatethedifferenceinmainbiocontrolenzymesoftheTrichodermaREMIstrains．There． suitsshowedthattheactivitiesofchitinaseand8—1，3-glucanaseofthestrainsTtrm68andTtrm31weresignificant- lyhigherthanthoseofthewildstrainT21，buttheconversewastrueforthestrainTtrm94．Thegenepartialse· quencesoftheseenzymeswerefurtherstudiedandtherewasagenefragmentinsertion (GGTATCGATATCGAC) intochitinasegenomeofthestrainsTtrm68andTtrm31，andagenefragmentinsertion (GTC)into8—1，3-glu- canasegenomeofthestrainTtrm94． Keywords Trichoderma REMIstrain； biocontrolenzyme； changeinenzymeactivity； differenceingene partialsequence 木霉具有快速生长、强产孢能力、分泌多种细胞