条斑紫菜多糖对四种人肿瘤细胞株生长的影响研究.pdfVIP

辽宁·土t 奎国谆淬生曲杖术与海痒焉■学术奎议论文童 2006．8．2-6 化活性指标均呈上升趋势。终浓度为0．5叽一2．09／L的羊栖菜硫酸多糖组均可使超氧阴离子自由基、羟 基自由基和DPPH的清除率明显增强．并且呈现良好的直线回归关系(口o．05)。 4．通过对羊栖菜硫酸多糖的基本组成总糖含量、岩藻糖含量及硫酸根含量与抗凝血和抗氧化活 性间的相关性分析。初步探索了羊栖菜硫酸多耱的构效关系。研究发现，岩藻糖含量及硫酸根含量与 抗凝血及抗氧化各指标存在显著的一次或二次相关关系，而总糖含量与各个指标则没有相关性。可见， 岩藻糖和硫酸根含量的多少决定了羊栖菜硫酸多糖的抗凝血和抗氧化活性。关于羊栖菜硫酸多糖的单 糖组成、糖链结构以及分支度等与活性的关系有待进一步研究。 条斑紫菜多糖对四种人肿瘤细胞株生长的影响 郭婷婷1徐红丽2周赞’张陆曦1顾佳雯’何培民’+ (1．上海水产大学水产种质资源发掘与利用省部级重点实验室，上海200433；2．第二军医大学生物化 学与分子生物学教研室上海200433；3．东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中一．72上海 200433；) 摘要：I目的】研究条盘紫菜多糖(Porphyrayezoensis I方法l体外培养条件下用不同浓度的条斑紫菜酸性多糖(PYP)处理4种癌细胞，通过MTT法观察 的生长的影响． PYP的抑制率分别为21．2％，23．6 72h后对其生长有明显的抑制作用，且呈剂量依赖效应，O．5mg／ml 得进一步研究． 关键词：条斑紫菜多糖；抗肿瘤；MTT法 低脂肪的营养丰富的食用海藻¨l。近年来，人们对条斑紫菜的提取成分及保健价值进行了广泛的研究， 发现其主要成分为多耱和蛋白质。条斑紫菜多鞯(Porphyrayezoensis 中提取的活性物质，具有降血压【2l、抗疲劳‘”、提高免疫力”1等生物学功能。研究表明海洋植物多糖 具有抑制肿瘤生长且对人体无毒副作用的特点，从海洋植物多糖中寻找高效低毒的抗癌药物是当前肿 瘤研究的重要内容之一。本室前期研究发现条斑紫菜粗多糖具有增强机体免疫功能的作用【5】．在此 基础上，我们通过MTT法，对四种人肿瘤细胞的生长进行观察和检测，旨在探讨条斑紫菜多糖对肿 瘤细胞生长的抑制作用，并为进一步研究其作用机理打下实验基础。 1材料 1．1材料 教研室提供。 1．2试剂 RPMI 鹤约业产品：M兀为美国Sigma公司产品。 1．3仪器蹬备 迁宁·上t,IbQ啐耳生静技术与略耳焉●学术奎议论文善 2006．8．2-,6 产品：C02恒温培养箱为美国FormaScientific产品：EL×800型酶标仪为美国Bio．Tek产品。 2方法 2．1 多糖提取与纯化 条斑紫菜烘干后剪碎，经酒精回流3h，自然阴干．样品中加入50倍体积蒸馏水．100C加热3h后 取上清液．95％乙醇沉淀，冷冻干燥得粗多糖。 将粗多糖溶解后上DE一52层析柱，加3mol／L NaCI洗脱液，流速O．5ml／min，自动部分收集器分 管收集，每管5ml，苯酚．硫酸法跟踪检测，收集吸收峰中间部分，经脱盐后冷冻干燥，得絮状酸性多 糖组分(PYP)，称重后4C保存备用。 2．2 MTT法检测 0．5-1 PYP；以生理盐水为空白对照组；加入体积均为10¨圩L，各设定12个平行孔。继续培养72h后，加 37C溶解过夜，待沉淀完全溶解后， 入10“Ⅳ孔MTT溶液(5mg／m1)，37C孵育4～6h，加入10％SDS 用酶标仪于595nm处测定吸光度值(A)。 2．3数据处理 ● 一 资料用均数±标准差(XiS)表示，两组比较用，检验，pO．05表示差异有统计学意义。 3结果 3+1 DE．52层析柱纯化条斑紫菜多糖 如Fig．1所示，条斑紫菜粗多糖纯化后出现二