水牛卵母细胞和孤雌激活早期胚胎端粒酶活性测定研究.pdfVIP

粒～分为二，～个携带了gag／pol编码序列及RRE，另一个包含了编码rev的序列。这种 焚理更减少了产生复制型癌毒的凡率，搜褥馒病毒鼗薄在建溪中更麓熬安全。 3慢瘸毒载体介导的转基因鸡的研究 Lois。and Pfeifer是震复制缺罄黉瘸毒载落磷究转基戮凄耪的先囊；熳瘸毒载体寝 用于转基因鸡的研究应归功于Roslin研究所资深科学家HelenSang的工作，他将VSV-G 镑型包装蕊重缝绿色荧光蛋叁(§鼯≥熬马簧染链贫盘痪毒(辇王g注射烈73个鸡蛋鳇 囊胚腔中，孵化后检测到12只转基因公鸡，其种系传递的概率最高达到了45％，并且G1 寨G2代转基因斡表达摸式帮表达承平穗对稳定，并盟没有发现纛菊黪基蠢沉黧蕊现象。 随着HelenSang这项开创性的研究成果的发液，Susan C．Chapman用含有磷酸甘油 澈酶《PGK)熹韵子元嚣熬耋缝的嚣薹p差馒病毒载钵黼各鑫在全奏各个缝绶孛表达S露熬转 基因鸡，Benjamin 鹑。 Biomedicaand Roslin研究所和Oxford 在输辩管孛蒋异经高水平表达两耱吴舂生耪学嚣缝鳇洛疗性蛋鑫～麓于治疗恶性黑色 之翥孬次被打开。 4应用狮景 转基因藕可缓解决鬻蓠皇稳潮药工遭漪蛋交生产瓶颈游慧，搜生产成本辩蛋盎徐格 将大大降低，熊另一个应用就是抗病育种等。 水牛卵母细胞和孤雌激活早期胚胎端粒酶活性测定臻 李秀林4煎 丹：石德顺；翊庆友3崔奎裔3 (1上海二医新生基因科技有限公嘲上海201611) f2主海毒薅牛研究赛上海200032) (3广西大学动物繁殖研究所南宁530005) 端粒DNA楚一段寓宙瞟呤碱基G的筒攀串联熏复序列，是稳定染色体末端的重要元 件。其长度照辫细胞的不断分裂丽逐渐缭短，当端粒缩短歪一个关键的长魔时，便会导 ‘国家爵然科学基众资助项目 致细胞交大、宸平并停止分裂焉死亡。因燕，许多翳究入员耨端粒称为细胞熬“分裂 包括蛋鸯噩基和RNA元髂。其中TER反转录酶(TERT)起催纯捧餍，RNA元磐起模板终震； 端粒酶通过自身RNA元件为模板在TER反转录酶(TERT)作用下合成端粒重复序列，此功 缝对浚复端粒长发，维持端粒的稳定其有重要意义，但端粒酶只存在于生殖缨胞、于缨 胞、肿瘤细胞及永生化的细胞，成体细胞一般无端粒酶活性。端粒酶在哺乳动物发育过 程中窭现骥曼变纯。有疆究表瞬，成熟舞母细麓蕊端粒酶活性相对较低，胚胎细艇靛端 粒酶活性相对较嵩，早期发育的胚胎都存在端粒酶活性，而分化的组织和细胞检测不到 端粒酶活性。然蠢，在冒海有关东牛孤雌激活(矬)瓤胎发育过程中麴端粒酶活性变化 尚未见有报道。为此，本研究将对水牛卵母细胞及PA胚胎不同发育阶段的端粒酶活性水 平进章亍测定，戮便弄清求牛舞母细胞及鞑胚胎早襄发育过程率的端粒酶活性交化规律， 深入了解水牛胚胎早期发生的相关机理。 本研究通过TRAP方法对水牛卵母缨麓和备发育阶段早期胚胎的端粒酶活性进行了 测定，结果发现，从高水平的端粒酶活性由来成熟卵母细胞到成熟卵母细胞逐渐降低， 直到成熟卵母细胞达到最低水平(pO。05)。高求平的端粒酶活性在牛的帮人鹃来成熟 卵母细胞可以鉴定出来。这种未成熟卵母细胞的高端粒酶活性和成熟卵母细胞的低端粒 酶活洼表明了在水牛穿母缀胞减数分裂中端粒酶的潜在作用。已经报道，在G￥生发泡破 裂，蛋白质和RNA的合成效率突然降低。而且，在卵泡发育过程中积累的多聚核替酸RNA 在减数分裂中薄解或者去聚合。这些生物纯学改交可麓与舜母细胞成熟的端粒酶活性降 低有关。 在瀚胚胎中，端粒酶活性从未成熟卵母细胞到“16细胞阶段的胚胎逐渐降低。在桑 椹胚阶段酶活性再次增加直到囊胚阶段达到最高水平，这与我们在IVF胚胎的研究一致， 但是端粒酶活性均眈相应阶段的IVF胚胎的高。原因可能是通过精予受精和孤雌激活的 卵母细胞由于不同的蛋白合成反应如蛋白质磷酸化藤形成不圊的细胞质。我们以前在 IVF胚胎的研究结巢发现，体外培养的2．4细胞和8～16细胞胚胎端粒酶活性的降低与其发 育过程中的发育阻滞有关。因为在水牛早期胚骆体外发育过程中，体外发育阻抑发生在 8—16细胞阶段，活化的端粒酶蛋白和卵母细胞中所贮存的端粒酶mRNA此时己消耗殆