静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究.pdfVIP

静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究.pdf

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昆明医学院硕士研究生论文 英文缩L写词表 英文缩写词 英文全称 中文全称 dulbeccoeaglesminimum- 改良eagles最低 Essentialmedium 必需培养液 FBS fetalbovineserum 胎牛血清 MCC mandibularcondyiarcartilage 下领裸突软骨 PBS phosphatebuffersolution 磷酸盐缓冲液 TMJ temporomandibularjoint 颜下领关节 TGF-pI transforminggrowthfactor-伪 转化生长因子一PI PFA Paraformaldehyde 多聚甲醛 DAB 二胺荃联苯胺 昆明医学院硕士研究生论文 静压力对骼突软骨转化生长因子01表达影响的体外研究 硕士研究生 张 敏 导 师 徐 芸 教 授 李 松 教 授 昆明医学院口腔医学院 口腔正畸学专业 摘 要 【目的】 建立裸突软骨体外器官培养模型,观察体外器官培养的裸突软骨在受 到一定时间的静压力作用后,转化生长因子p,(TGF-伪)表达的变化;在软骨器官水 平上观察静压力对裸突软骨细胞表达TGF-(i1的影响。 【材料和方法】(1)选用新生SD大鼠的裸突软骨作为器官培养材料,采用格栅式 器官培养法,建立体外裸突软骨器官培养模型.分别在取材培养后 1-6天收集样本, 4%多聚甲醛固定、石蜡包埋、切片,行HE染色。(2)解剖、培养10个解突软骨,培 养到24小时,应用静压力加载装置对其中5个(实验组)加载强度为l卿a的持续静 压力1小时。加力完成后两组同时收集样本。进行HE染色观察软骨生长状态。用免 疫组化技术检测实验组和对照组嵘突软骨TGF-pI表达,用彩色病理图像分析仪检测裸 突软骨各层TGF-3(I表达的强度。对照组除软骨不加力外,其它培养条件与实验组相同。 【结果】 裸突软骨体外器官培养:切片显示在体外器官培养过程中,培养早期 (4天以内),辞突软骨层次分明,细胞结构完整的,形态良好。随着培养时间延长至 5天,细胞表层局部细胞出现空腔,周围的细胞早期结构清晰完整,随后出现崩解。 静压力对裸突软骨的影响:对实验组和对照组的散突软骨分别进行HE染色及 TGF-pI免疫组化染色。HE染色切片观察到两组砚突软骨的细胞层次结构无明显差异; TGF-01免疫组化染色切片显示,实验组的裸突软骨各层细胞TGF-(ii表达均增强 (P0.05).其中成软骨细胞层改变最明显 (P0.01). 【结论】 1.应用格栅式器官培养系统在6天可成功培养裸突软骨。培养到 1-4 天内,裸突软骨细胞层次清晰,结构完整,表明裸突软骨生活状态良好。5天后,散突 昆明医学院硕士研究生论文 软骨表层部分出现空腔,既而发生细胞崩溃。培养至24小时的裸突软骨结构保持比较 完好,故选择此时进行加力实验。 2.培养到24小时的Wi突软骨用强度为10Kpa(100g/c

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