马齿苋多糖对小鼠大脑神经细胞代谢损伤修复机制的研究.pdfVIP

第 50卷第 2期 湖 北农 业 科 学 Vo1．50No．2 2011年 1月 HubeiAgriculturalSciences Jan．，2011 马齿苋多糖对小鼠大脑神经细胞代谢损伤修复 机制的研究 康 洁 (商丘师范学院生命科学系 ．河南 商丘 476000) 摘 要 ：为探讨 马齿苋 多糖 (P0ulac。0leM eapolysaecharide，POP)对 小鼠大脑神经 细胞代谢 损伤 的修 复 保护机制．采用原代培养小鼠大脑神经细胞的方法 ，分别用20~mol／L的p淀粉样蛋 白(p—amyloid，A31) 处理原代培养细胞 、20 mo1／L的A6加 10mnieI1／L的POP共 同处理原代培养细胞 ；对处理的原代细胞 进 行倒置相差 显微 镜观察 与PI—Hochest双染 色成 活分 析 ．用 Westernblotting检测 处理后的原代 细胞 P35和 P25条带的表达 ；pEGFP—tau—s3和pcDNA—GSK一3B转染原代培养细胞 ，pEGFP—tau—s3和 pcD— NA—GSK一3B加 POP共 同转染原代培养细胞 ，48h后荧光观察和Westernblotting检测 GSK一3p的表达 。 结果显示．倒置相差显微镜下经 20~mol／LAt3处理 的原代培养细胞 出现 了皱缩 ，部分细胞死亡 ；经PI— HochestyK,染色细胞成活分析 ，Ap和 POP共 同处理的原代培养细胞成活率明显高于只8／Ap处理 的原 代培养细胞 ；WestelTlblotting检测到 A31处理 的细胞 出现 了P25条带 ，而A31加 POP共 同处理 的细胞 P25条带明显减弱 ：Western blotting检 测发现 ，pEGFP—tau—s3和 pcDNA—GSK一3p与 POP共转染 的细胞 中，其 tau蛋白的迁移率 高于只转 染pEGFP—tau-s3和pcDNA—GSK一3p的细胞 tau迁移率。所以POP对 小鼠大脑原代培养细胞A31损伤有修复保护作用．并能减少P35到P25的裂解和GSK一3B对tau的磷酸化 。 关键词 ：马齿苋 多糖 ；小鼠；大脑神 经细胞 ；B淀粉样 蛋白；tau蛋白；修复机 制 中图分类号：Q539；$865．1*3；Q954．67 文献标识码 ：A 文章编号：0439—8l14(2011)02—0353—05 TheM etobolism RegeneratingM echanism ofPortulaca oleracea P0lysaccharide on M ouseBrain Neurons KANG Jie (DepartmentofLifeSciences，ShangqiuNormalCollege，Shangqiu476000，Henan，China) Abstract：Themethodoftheprimarycultureofmousebrainneuronswasappliedtodiscusstheprotectiveregeneratingmechanism ofPortulacaoleraceapolysaechafide (POP)onthemetabolism damageofmousebrainneurons．．Theculturedcellsweretreatedwith 20~mol／L31-amyloid (A31)，an