罗格列酮对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗的作用.pdfVIP

第32卷总第83期 西 北 民族 大 学 学 报(自然科学版) Vo1．32，No．3 2011年 9 月 JournalofNorthwestUniversityforNationalities(NaturalScience) Sep，2011 罗格列酮对 3T3一L1脂肪细胞 增殖及胰岛素抵抗的作用 郭晓农 (西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730030) [摘 要】目的：探讨罗格列酮对脂肪细胞增殖和胰岛素抵抗的影响 ．方法：培养3T3一L1前脂肪细胞，用四甲基偶 氮唑盐(m )方法检测3T3一U 前脂肪细胞及脂肪细胞的增殖情况，同时采用地塞米松诱导3T3一LI脂肪细胞建立胰 岛素抵抗模型，检测罗格列酮对细胞培养基中葡萄糖浓度的影响 ．结果：在DMEM 高糖培养基中，罗格列酮可促进 3T3 一 L1脂肪细胞增殖，抑制3T3一L1前脂肪细胞增殖；使3T3一L1前脂肪细胞及 3I3一L1脂肪细胞葡萄糖消耗量增加； 罗格列酮能明显增加胰岛素抵抗3T3一u 脂肪细胞培养基 中的葡萄糖消耗量，增强对胰岛素的敏感性 ．结论：罗格列 酮可以促进脂肪细胞的增殖，抑制前脂肪细胞的增殖，罗格列酮对地塞米松诱导3T3一L1脂肪细胞的胰岛素抵抗具有 明显的改善作用 ． [关键词】罗格列酮；3T3一LI脂肪细胞；细胞增殖；胰岛素抵抗 [中图分类号】Q5—33 [文献标识码】A [文章编号】1009—2102(2011J03—0058—03 胰岛素抵抗是2型糖尿病病理生理学的中心环节 ．罗格列酮属噻唑烷二酮类药物，是过氧化物酶 体增殖物激活受体(PPAR)激动剂，可以增强胰岛素敏感性，改善糖脂代谢、胰岛素抵抗及炎症反应 ． 本文采用地塞米松诱导3T3一L1脂肪细胞胰岛素抵抗细胞模型，旨在研究观察罗格列酮对脂肪细胞增 殖及胰岛素抵抗的药理作用 ． 1 材料和方法 1．1 材料和试剂 马来酸罗格列酮片(RosiglitazoneMaleateTablets)购 自葛兰素史克(天津)有限公司；3T3一L1前脂 肪细胞购 自中国医学科学院基础研究所；地塞米松、胰岛素、3一异丁基一1一甲基黄嘌呤(批号034K3734)、 含酚红DMEM高糖培养基、无酚红 DMEM 高糖培养基，上述试剂均购 自Sigma公司 ．M1_r(批号 1313Bl1)购自aMResco公司；优级新生小牛血清购 白兰州民海生物工程有限公司；葡萄糖临床检测试 剂盒购 自四川迈克公司 ． 1．2 方法 1．2．1 3T3一L1前脂肪细胞的培养和诱导分化 参考AnilKumarK． ]的方法，进行前脂肪细胞分化：将 3T3一L1前脂肪细胞放置于含有 10％小 牛血清的DMEM高糖培养基中，在37℃、5％CO、饱和湿度的条件下培养 ．待细胞融合2d后，加含 O．5mmol·L叫3一异丁基一1一甲基黄嘌呤，O．25l／mol·L 地塞米松，10 g·mL 胰岛素，1O％小牛血清的 [收稿 日期】2011—07—28 [基金项目]西北民族大学科研项目(XBMU一2010一BD一125) [作者简介】郭晓农(1975一)，男，甘肃兰州人，讲师，硕士，主要从事生化药理学方面的研究． 一 58 — DMEM高糖培养基培养48h，然后换以含1O g·mL-1胰岛素的培养基培养48h，随后用10％小牛血清 的DMEM高糖培养基继续培养，2d换培养液 1次，诱导分化8～12d的3T3一L1细胞90％以上呈脂 肪细胞表型可用于以下试验 ． 1．2．2 MTT法测定3T3一L1前脂肪细胞和3T3一L1脂肪细胞增殖 当接种子96孔板的313一L1前脂肪细胞及脂肪细胞达到约80％融合时，换以含胰岛素与不含胰 岛素罗格列酮的培养基孵育48h，用葡萄糖临床检测试剂盒 2测定培养基上清液中的葡萄糖含量，计 算每组细胞的葡萄糖消耗量，然后每孔加入MTT(5mg·mL．1)10 L继续孵育4h，将培养基倒尽、吸 干，每孔加入200 L二甲基亚砜，混匀后置酶标仪570nm处测定吸光度值，观察罗格列酮对3T3一L1 前脂肪细胞和脂肪细胞增殖的影响 ． 1．2．3 3T3一L1脂肪细胞胰岛素抵抗细胞模型的建立及药物处理 参考文献方法建立胰岛素抵抗细胞模型[33]．在胰