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替罗非班汀对急性冠脉综合症患者过氧化物酶体增生激活型受体γ与CD40CD40L表达的影响
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替罗非班汀对急性冠脉综合症患者过氧化物酶体增生激活型受体γ与CD40CD40L表达的影响
1.邯郸市第一医院056000 2.永年县中医院057150
摘要:目的 观察替罗非班对急性冠脉综合征(ACS)患者过氧化物酶体增生激活型受体gamma;( PPAR-gamma;) 与CD40/CD40L通路表达的影响。方法 选择ACS患者120例,随机分为对照组和不同时间段替罗非班组, PCI术后12h、24h、36h分别抽取病人血液,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PPARgamma;与CD40、CD40LmRNA表达。结果 不同时间替罗非班组与对照组相比, CD40与CD40LmRNA水平明显降低(Plt;0.05),并呈时间依赖性;而常规治疗组PPARgamma;mRNA表达量处于低水平状态,应用替罗非班后12h、24h、36h后表达量上升,其作用亦呈时间依赖性。结论PPAR-gamma;是CD40-CD40L信号通路的上游调节机制,替罗非班能上调PPAR-gamma;mRNA表达, 能抑制CD40/CD40L信号通路的激活,从而具有抑制炎症、稳定粥样斑块作用。
关键词:替罗非班;过氧化物酶体增生激活型受体gamma;;CD40/CD40L通路;急性冠状综合征
中图分类号: R541.4 文献标识码:A
1 对象和方法
1.1 对象:收集2014年1月至2015年5月本院心内科ACS患者120例,男60例,女60例,年龄在42~75岁。其中1) 有心电图和/或酶谱改变的急性心肌梗死(AMI) 64例( 男35例, 女29例, 平均65.6plusmn;10.3 岁;2) 不稳定性心绞痛(UAP) 56 例( 男22 例,女34例, 平均61.2plusmn;8.5 岁) , 48小时内劳力性心绞痛加剧并出现静息状态下心绞痛。所有研究对象均无恶性肿瘤、肝脏病变、肾功能不全、血液性疾病、感染性疾病和自身免疫性疾病, 近半年内无重大外伤、手术史。将上述患者随机分组,每组40例,各组年龄分别为( 55.1plusmn;8.9)岁vs (52.5 plusmn;9.8)岁,无显著差异。全部病例行常规治疗,包括抗血小板、抗凝、扩冠治疗;常规治疗未应用替罗非班,治疗组加用替罗非班,替罗非班用量根据公斤体重计算,( 起始推注剂量为10mu;g/kg,在3分钟内推注完毕,而后以0.15mu;g/kg/min的速率维持滴注,维持量滴注持续36小时(欣维宁,武汉远大制药) 。
1.2 取材及方法:取材:常规治疗组次日清晨抽血,应用替罗非班组12h、24h、36h,分别抽取病人血液标本3ml,立即注入预先加有无菌3.8%柠檬酸钠0.2ml 的抗凝管中备用。方法:(1 分离血单一核细胞: 按文献进行。(2 按Trizol试剂盒说明书提取总RNA,将RNA在-700C保存待测。(3 然后进行逆转录-聚合酶链反应,紫外凝胶图像分析仪进行数据分析,以目的基因mRNA扩增后产物的光密度值与内参照GAPDHmRNA扩增后产物光密度值的比值作为mRNA表达的相对值。(4 PPARgamma;、CD40、CD40L及内参GADPH的引物序列见表1。
表 1 引物序列
引物 引物序列 目的片段(bP)
GADPH 上游5rsquo;- GTG GGG CGC CCC AGG CAC CA- 3rsquo; 450bP
下游5rsquo;- CTC CTT AAT GTC ACG CAC GAT TC- 3rsquo;
CD40 上游5rsquo;-TGC CAG CCA GGA CAG AAA CT-3rsquo; 420bP
下游5rsquo;-GGG ACC ACA GAC AAC ATC AG-3rsquo;
CD40L 上游5rsquo;-ACA TAC AAC CAA ACT TCT CCC-3rsquo; 399 bP
下游5rsquo;-AGA TGT TGT TTT ACT GCT GGC-3
PPARgamma; 上游: 5rsquo;- TCT CTC CGT AAT GGA AGA CC- 3rsquo; 474bP
下游: 5rsquo;- GCA TTA TGA GAC ATC CCC- 3rsquo;
1. 3统计学处理
所有数据以Xplusmn;S表示,数据处理采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析,多重比较采用SNK法,Plt;0.05
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