核苷酸类似物相关乙型肝炎病毒逆转录酶耐药突变分析及rtA181耐药突变的个体化再治疗.docVIP

精品论文 参考文献 核苷酸类似物相关乙型肝炎病毒逆转录酶耐药突变分析及rtA181耐药突变的个体化再治疗 周继明 　　（解放军第153中心医院 450000） 　　【摘要】目的：对核苷酸类似物（NUCs）治疗慢性乙型肝炎（CHB）病人时出现的逆转录酶（RT）耐药突变现象进行分析，并针对rtA181耐药突变现象进行血清检测，观察其个体化再治疗的效果。方法：以焦磷酸测序法（PCR）对489名CHB病人的HBV rt区中的十个耐药突变位点予以定理检测并进行突变分析，并对LAM+ADV组中的43名rtA181突变病人分组进行个体化再治疗，A组予以EDV治疗，B组予以LdT治疗，对比其临床疗效。结果：（1） DNA类型为C型者占82.4%，B型者占17.6%,其中C型耐药变异率为56.6%，B型耐药变异率为43.0%；（2）265份显示与LAM、LdT、ETV以及ADV有显著相关性；（3）rtA181突变病人的HBV DNA水平为明显低于疗前水平，Plt;0.05；（4）对rtA181突变病人行个体化再治疗时，HBV DNA lt;6lg copies/mL时的疗效更好，且ETV治疗的效果比LdT治疗好（Plt;0.05）。结论： HBV耐药突变以M204与A181为主，对rtA181突变病人，加/换用ETV的疗效较好。 　　【关键词】核苷（酸）类似物 乙型肝炎病毒 耐药突变 rtA181 　　【中图分类号】R45 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）12-0111-02 　　当前治疗慢性乙型肝炎（CHB）的主要方法是抗病毒治疗[1]。其中又以核苷酸（NUCs）治疗最具认可度。然而，大部分病人无法在短时间内实现持久应答，且NUCs治疗时间越长，相关HBV逆转录酶（RT）的耐药安全性越低。耐药突变不但会使治疗变得更复杂，还可能促进病情进展，引发严重肝脏疾病[2]。本文主要分析NUCs治疗期间出现的HBV rt耐药突变现象，探讨rtA181突变的个体化再治疗方案。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 2009年3月—2013年10月期间，本院共489名CHB病人在接受NUCs治疗期间出现耐药突变。病程gt;半年，疗前平均HBV DNA为（6.20plusmn;1.41）1 lg copies/mL。其中男性病人402名，女性病人87名，年龄范围13—71岁，平均约42.1岁。 　　1.2方法 （1）DNA扩增以及测序：提取CHB病人的血清样本，以PCR法对RT区的基因片段进行扩增。P1和P2区（nt18-40和nt1320-1301）扩增第一轮，P3和P4区(nt56-75和nt1272-1253)扩增第二轮。（2）耐药分析：通过焦磷酸测序法，定量检测489名CHB病人的HBV rt基因区十个NUCs相关耐药突变处，十个位点分别为rtI169T、rtV173L、rtL180M、rtA181V/T、rtL184G、rt194T、rts202I、rtM204V/I、rtN236T、rtM250V。并分析各个耐药突变位点分别和拉米夫定（LAM)、替比夫定（LdT)、恩替卡韦（ETV)以及阿德福韦酯（ADV)的相关性。同时，对rtA181发生突变的病人做血清HBV DNA检测，血清HBsAg定量检测以及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平检测。（3）rtA181突变病人个体化再治疗：将rtA181突变病人分为2组，A组加/换用ETV，B组加用LdT,对比其治疗效果。 　　1.3统计方法 所有数据由SPSS16.0处理，统计学差异以Plt;0.05标记。 　　2 结果 　　2.1 HBV DNA类型分布 DNA类型为C型者占82.4%，B型者占17.6%,其中C型耐药变异率为56.6%，B型耐药变异率为43.0%，Plt;0.05。见表1。 　　表1 HBV DNA类型分布[n(%)] 　　总例数 B型 C型 B型耐药变异 C型耐药变异 　　489 86（17.6） 403（82.4） 37（43.0） 228（56.6） 　　P值 lt;0.05 lt;0.05 　　2.2 HBV耐药点分析 489份血清样本均测序成功，其中有265份显示与LAM、LdT、ETV以及ADV有显著相关性。按照病人的用药及耐药突变情况进行分组得：LAM组共138人，其中主要为M204I/V合