反相离子对色谱法分析13丙二醇发酵液中的有机酸研究.pdfVIP

C034 反相离子对色谱法分析 1，3 －丙二醇发酵液 中的有机酸 牟英 修志龙 大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系，大连 116024） （ 摘 要 采用离子对液相色谱法在 Kromasil C18 色谱柱(5 μm,4.6mm ｉ. ｄ. ×25cm)上测定了 1， 3 －丙二醇发酵液中的有机酸，流动相(pH2.75)为 5mmol/L 磷酸二氢钾和甲醇混合溶液，其中加 入了四丁基氢氧化铵为离子对试剂。发酵液经氯仿处理后直接分离定量，8 分钟内可将发酵液 中的琥珀酸、柠檬酸、延胡索酸完全分离定量，流动相的流速为0.95mL/min，紫外检测波长为 220nm 。多次实验结果表明，该法是测定发酵液中有机酸的快速、有效的定量分析方法。 关键词 离子对色谱 有机酸 1 ，3 －丙二醇 发酵液 Determination of Organic Acids in 1,3-Propanediol Fermentation Broth by Ion-pair Chromatography Mu Ying and Xiu Zhilong (Department of Bioscience and Biotechnology, School of Environmental and Biological Science and Technology, Dalian University of Technology, Dalian, 116024) Abstract Ion-pair chromatography on a column of Kromasil C18 (5 μm,4.6mm ｉ. ｄ. × 25cm) with an eluant containing 5mmol/L potassium dihydrogen phosphate, methanol, and tetrabutyl ammonium hydroxide (pH 2.75) was used for the analysis of organic acids in 1,3-propanediol fermentation broth. The solution of samples was pretreated with chloroform. The succinic acid, citric acid and fumaric acid were completely separated and determined in 8 minutes. The flow rate of mobile phase was 0.95 mL/min. The detection wavelength was 220nm. The method was proved to be a rapid, effective way to determine the organic acids in 1,3-propanediol fermentation broth. Keywords Ion-pair chromatography, organic acids, 1,3-propanediol, fermentation broth 引 言 1，3—丙二醇是一种重要的化工原料，可用作溶剂、抗冻剂、精细化工原料，作为一 种含有双官能团的有机物，1，3—丙二醇可用作合成聚酯、聚醚和聚亚胺酯的单体[1] 。在 1，3—丙二醇发酵过程中，产物 1，3—丙二醇生成的同时还有其他一些有机酸生成。测定 1 这些副产物的生成对于确定菌体内的代谢通量分布进而对于发酵过程的优化控制以及 1，3 —丙二醇高产基因工程菌株的构建都具有重要意义。用于发酵液中有机酸分析分离的方法 很多，高效液相色谱法（HPLC ）是近年来发展较快的分析方法。HPL