乳铁蛋白抗丙型肝炎病毒的机制及其应用.docVIP

乳铁蛋白抗丙型肝炎病毒的机制及其应用 ? 144?国外医学卫生学分册2006年第33卷第3期 034乳铁蛋白抗丙型肝炎病毒的机制及其应用 罗薇,刘宁综述 (东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨150030) 摘要:乳铁蛋白(u)是转铁蛋白家族中的一员,具有多种生物学功能.据报道在体外培养细胞中u能抑制丙型肝炎病毒感 染,并且是由于u的第6oo一605位和第625—632位氨基酸片段与丙型肝炎病毒包膜蛋白E2蛋白质直接作用,破坏丙型肝炎 病毒复制.本文对u抗丙型肝炎病毒机制及其在临床应用方面的研究现状作一综述. 关键词:乳铁蛋白;丙型肝炎病毒;包膜蛋白 中图分类号:R154文献标识码:A文章编号:1001—1226(2006)03—0144.03 丙型肝炎病毒(HCV)属黄病毒科,其基因组为 单股正链RNA,易变异,目前可分为6个基因型和若 干亚型.HCV基因组含有一个开放读框(ORF),编 码1O余种结构和非结构(NS)蛋白如:核心蛋白, E1,E2,P7,NS2,NS3,Ns4A,Ns4B,NS5A和NS5B. HCV基因型的复杂性成为丙型肝炎疫苗生产的障 碍.目前公认的治疗急性丙型肝炎的药物为干扰 素,但效果也仅达30%,抗病毒药物联合应用效果 很好,但副作用明显. 乳铁蛋白(1actoferrin,Lf)是一种具有多种生理 功能的天然活性糖蛋白,属转铁蛋白(transferrin,Tf) 家族,分子量约80kDa,包括两叶(N.叶和c.叶),每 叶能绑定一个Fe¨,此二叶同源性较高,约为35%. 目前已经研究清楚IJf的空间结构.尽管IJf的整体 结构与Tf非常相似,也具有很多相似的生理功能, 都是体内运输铁的主要物质,但IJf还具有两个特 性,首先,IJf的铁结合常数是Tf的300倍;其次,与 Tf相比IJf有很强的抗菌活性,起作用的主要是氨基 端.现已证明IJf还具有抗病毒作用,包括抗人免疫 缺陷病毒(HIV),抗巨细胞病毒,抗疱疹病毒I和Ⅱ 型,抗轮状病毒等作用¨J,近几年还发现IJf对 HCV也有抑制作用,有望开辟治疗肝炎的新途径. 1Lf抗HCV的机制 1.1与病毒颗粒作用 HCV有两个包膜糖蛋白E1,E2,1997年Yi等 发现包膜糖蛋白E1,E2能够形成异低聚物,而脱脂 收稿日期:2005—09—12;修回日期:2006.03.09 基金项目:黑龙江省高等院校骨干教师创新能力资助计划 作者简介:罗薇,女,硕士研究生,研究方向:食品营养. 乳中IJf能够阻碍E1,E2键的断裂,因此猜测IJf能 结合HCV包膜蛋白.他们通过十二烷基硫酸钠聚 丙烯酰胺凝胶电泳法对这两种蛋白进行分离和纯 化,用蛋白质印迹法证实人乳IJf与E1,E2蛋白结 合.在体外通过拆分法(pul1.downassay)进一步证实 IJf能结合HCV,它使用了免疫沉淀反应生成的IJf结 合蛋白树脂A;抗IJf抗体能有效地与E2蛋白发生 联合免疫沉淀反应,证实IJf在体内也能直接结合E2 蛋白.以上说明IJf能与病毒颗粒发生作用. Ikeda等将牛IJf与HCV进行预培养处理,再 加入到人工培养的肝细胞株(PHSCH8),利用PCR 技术检测病毒感染情况,结果发现IJf能有效阻止肝 细胞感染HCV;但是若先将牛IJf与PH.SCH8预处 理,再加入HCV则不能阻止病毒感染,证实牛IJf抗 HCV活性是由于和HCV直接作用的结果.进一步 研究发现人IJf也有此作用,而Tf家族中其他成员却 没有此作用.现已发现IJf氨基端的环状结构是其 抗菌活性的重要区域,但却与抗HCV活性无关,提 示其它区域在抗HCV感染中起作用. 为了调查肝细胞表面受体中感染HCV的决定 因素,Matsuura等和Tamura等先后利用水泡性 口膜炎病毒(VSV)重组体与HCV包膜蛋白E1,E2 制成了HCV.VSV3种假模型VSVdeltaG*(HCV), VSVdeltaG*(E1)和VSVdeltaG*(E2).在VSV被 VSV抗体完全中和的情况下观察肝细胞系(HepG) 被感染的情况,用胰蛋白酶,衣霉素,硫酸盐多聚糖, 链霉蛋白酶,肝素酶,类肝素酶(heparitinase)等处理 细胞系来降低感染,但是VSVdeltaG*(HCV)的传染 能力仍能达到90%,而且发现VSVdeltaG*(HCV)的 传染能力比vsVdeltaG*(E1)和VSVdeltaG*(E2)高1O 国外医学卫生学分册2006年第33卷第3期?145? ～ 20倍,提示细胞表面糖蛋白类在HCV感染中起重要 作用. 1.2Lf与HCV的结合部位 u是一种糖蛋白,由一条多肽链构成,其多肽 链上结合有二条糖链,含量为7%左右,组成包括半 乳糖,甘露糖,N.乙酰半乳糖胺,岩藻糖以及涎酸