顺9反11共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞的影响研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会养猪学分会论文集 顺9，反11一共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞 和结肠粘膜上皮细胞的影响水 邹书通1蒋宗勇1料郑春田1林映才1周桂莲1杨琳2 (1．广东省农业科学院畜牧研究所广东省动物育种与营养公共实验室，广东广州510640； 2．华南农业大学动物科擘学院，广东广州510642) 摘要为了探讨顺9，反11．共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞、结肠粘膜上皮细胞增殖、PGE2分’泌PPAR--y基 因表达的影响，进行了本试验。试验分5个处理，对照组为DMEM／F12培养液，其它处理分别在对照组的基础上 添加100 lmaol／L亚油酸、25、50和100 测定4个重复)。细胞有血清培养24h后处理，继续培养72 h。检测上清PGE2分泌、细胞增殖和细胞PPAR-?mRNA 拷贝数。结果表明培养液中添加顺9，反11珙轭亚油酸对肝细胞增殖和PGF_,2分泌都有促进作用(P．以05)，但对 PPAR基因表达没有影响；培养液中添加顺9，反11珙轭亚油酸对结肠粘膜上皮细胞增殖影响不显著(脚．05)， 对PGE2分泌有显著的促进作用(尸锄．05)，25imaol／L顺9，反11珙轭亚油酸组PPAR吖mRNA拷贝数显著高于对 100 照组(尸如u)5)， i．tmol／L顺9，反儿．共轭亚油酸组极显著高予对照组(尸如．01)。可见，在离体培养条件下， 顺9，反11珙轭皿油酸对猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞POE2分泌都有促进作用，只对结肠粘膜匕皮细胞PPAR-7 基因表达有促进作用。 关键词顺9，反ll珙轭亚油酸肝细胞结肠粘膜上皮细胞增殖前列腺素助(P(湖三2)过氧化物酶体增殖 物激活受体吖(PPAR-y)基因表达 共轭亚油酸是—类含有共轭双键的十八碳二烯酸(亚油酸)异构体混合物。在这些异构体中，顺9， 反11．共轭亚油酸异构体和反10，顺12．共轭亚油酸异构体被认为是最主要的具有生物活性的异构体；顺9， 反11．共轭亚油酸在提高动物体的免疫功能、抗癌和提高动物的生长性能方面作用较大，而反10，顺12- 共轭亚油酸在改变动物机体的脂肪代谢方式以及降低脂肪在动物体内的沉积方面起主要作用(Pariza等， 2001)。 1979年以来，研究人员相继发现共轭亚油酸具有抗癌、抗动脉硬化、抗糖尿病、降低脂肪沉积、促进 骨生成、提高免疫功能等功能(Pariza等，2001)。其中，共轭亚油酸改善动物免疫功能的研究是目前研究 早期断奶仔猪因肠炎引起的肠道粘膜损伤，促进结肠粘膜过氧化物酶体增殖物激活受体吖(PPAR-丫)基因 表达。肝脏和结肠粘膜是仔猪在早期断奶免疫过程中比较重要的部位，它们也可能是共轭亚油酸作用的关 键部位。通过离体细胞培养，影响因素单一，最能反应单一物质的作用。但是共轭亚油酸对离体培养细胞 本试验旨在探讨在离体培养条件下，顺9，反11．共轭亚油酸对猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞增殖、P(；】龟 分泌和PPAR吖基因表达的影响，进而在离体细胞培养的角度探讨共轭亚油酸与断奶仔猪免疫的关系。 1材料与方法 1．1试验动物与细胞 结肠粘膜上皮细胞取自1d未吮奶的健康杜×(了汉长)三元杂仔猪，肝细胞取自14d健康杜×(大×长) +基金项目：广东省自然科学基金重点项目(036747)，广东省攻关计划(2003821405)。 作者简介：邹书通(1978-)，男，硕士，主要从事猪营养的研究。 拇通信作者：蒋宗勇，E-mai h—jiangz41—@163,com。 230 饲料营养与添加剂 三元杂仔猪，猪只均由广东省农业科学院畜牧研究所试验猪场提供。 1．2主要仪器与试剂 荧光定量PCR仪(ABI Ix70-121，日本)；电泳凝胶成像系 7000，美国)；倒置生物显微镜(Olympus Innotech 统(舢pha 公司；荧光定量试剂盒购自美国ABI公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；