大鼠脑内3H+MD801结合位点放射自显影分布.pdfVIP

尸一- 世界医学杂志 “帕金森病及头痛临床与基础研究新进展”研讨会 大鼠脑内3H【]MK-801结合位点放射自显影分布 温绍君 张 忱 文 杰 土T?梅 工金城 房芳 张出 目的 NMDA受体不仅参与神经元突触兴奋性和可塑性活动的调节 而且在缺血性脑损伤、癫病、 Alzheimers病，Parkinsons症等病理过程中发挥重要的介导作用口本文主要表明该受体的分布特征 方法 以【H1MK-801为配基，采用放射自显影受体显示术体外结合实脸观察大鼠大脑 (第29层面) NMDA受体的分布情况. 结果 [H了MK-801结合位点在丸乳丸脑的分布是广泛而不均匀的.海马区分布密度最高，其次为皮 层、纹状体和丘脑核团. 结论 受体放射自显影米所示的[H]MK-801结合位点的分布特征反映了NMDA受体复合物的分布 特征.NMDA受体在海马区含量最为丰富，皮层、纹状体和丘脑核团次之 关键词 NMDA受体 大鼠犬脑 放射自显影术 分布 [HlMK-801 中枢神经系统兴奋性氨基酸离子 的分布特征 实验曝光法确定最佳曝光时间宏观 型受体NMDA受体通道复合体 (简 自显影制备:断头处死大鼠，完整取 称NMDA受体)激活后，可引起神经 材料与方法 出脑组织，迅速投入干冰乙醇浴之正 元细胞膜对Na,K和‘Ca通透性增 己烷 (-700C)中速冻20秒，-700C保存， 强，产生兴奋性突触后电位气 它参 实验动物 复温48/)、口少后，恒冷箱切片机切片 与神经元的生长、发育、生命节律的 Sprague-Dawley大鼠8只，雄性， 片厚20Pm，贴片于1%明胶涂布的载 调控比以及学习记忆中长时程突触 体重200-250克，购于北京医科大学 玻片上冻干先放入缓冲液(50mMTris- 增强效应 (LTP)ni并在脑缺血141 实验动物中心。 Hcl,40mMNacl,50mM蔗糖，PH7.4) 癫痛到‘、精神疾患内及一些神经退行 200C预孵育20分钟、随后用冲洗液 性病变(如老年性痴呆、Parkinson病、 放射自显影受体显示术 (50mMTris-Hcl,50mM 蔗糖，PH7.4) Alzheimers病，，等)中起着重要的介 村料 放射性配基[H]MK-801 200C洗涤20分钟以去除内源性配基， 导作用。关于NMDA受体的生物学 [(+)-5-methyl一10,1l,dihydro-SH-dibenzo 冷风吹千 然后按最佳孵育条件(30nM 特性已引起学者们的广泛关注MK-801 (a,d)cyclohepten-5,10-iminemaleate], 汇H]MK-801,50mM蔗糖、50mMTris- 为NMDA受体的非竟争性拮抗剂，可 22.5Ci/mmol,美国Dupont公司产品; Hcl缓冲液，PH7.4)20-C孵育30分钟 特异性结合于受体通道内部 利用此 氖片:[H]superfilm.美国Dupont公 孵育后用新鲜配制的冲洗液洗脱游离 司产品 配基，共洗2遍 每遍20秒.冷风吹 特点可探知NMDA受体的分布情况 实验步骤 参照文献训首先确定 干后按绞链接触法制备宏观自显影， 本文即以[H]MK-801为配基采用放