MDM2在宫颈癌和尖锐湿疣中的作用研究.pdfVIP

MDM2在宫颈癌和尖锐湿疵中的作用 中国医学;斗学院中国协和医科大学 晋红中 址 京 协 和 医 院 王家璧 尖锐湿珑是一种常见性传播疾病，其发病率不断增高，尖锐湿庆1吓发生f外阴皮肤，也 可发生于阴道、宫颈等处_宫顶蝙是一种恶性肿瘤，在女{女，卜发病率较高。HPV主要分为 低危}}1和高危型两型，11PV16,18是高危型中最常见的两1-U,,而HV6,11是低危型中最常 见的两型。尖锐湿4t-常与低危型FIN感染有关，宫颈癌常与高危,}lFPV感染有关。官颈癌 主要分为宫颈鳞状细咆癌和腺癌，鳞状细胞癌占多数 上要为HPV16感染;宫颤腺癌，占 宫颈癌的 15%,常与lma -18有关，本文主要研究宫颈鳞状细胞拙。N/A12(murinedouble tnlnut。一2)蛋白是一种癌基因 MAU痛墓因的产物可以与P53I自发生结合，抑制P53介 导的转录激活作用。因此可以起到一种对P53的负凋节作用。目前尚无比较官颈尖锐湿扰和 外阴尖锐湿疵中mm 表达的研究报道。本文日的 探1寸HPV感染43}病宫颈鳞状细胞癌、 宫颈尖锐湿优,州tl}尖锐湿ITC中NII)VLmW 1及蛋白的表达情况，以明确Nll?M2在宫须鳞状 细饱癌、官颈尖锐湿庆、外阴尖锐湿沈发病中的作用，发生f不同部位的尖锐湿优 (宫颈和 外阴)是否存在差异 实验方法 一、病例及方法 1.46例宫颈鳞状细胞癌标本来自中国医学科学院种瘤医院门诊及住院确诊的宫烦鳞状 yw胞癌患者。19例宫颈尖锐湿疵及34例外阴尖锐湿痊标本来自北京协和医院 对照组取 自 皮肤科及妇产科门is手术:rF常宫颈4例，外阴IF常皮肤.5例。取材方法为常规消毒，2 利多1-因局部麻醉，切口或钻孔取材，常规10%中性福尔马林固定，石蜡包理，室温存放 部分标本分为两部分，一部分冷冻f一70V，作RT-P(R用，其中宫颈鳞状细咆癌6例、宫 颈尖锐湿庆6例 外阴尖锐湿庆8例_ 2 杭 休 抗 体 Nr 单/多克隆克隆 效 阶 龙 让 I:H丫) 1w,iaCm a 人们w 2 鼠抗 人 c(x,NUNt2、旧1引物合成:中国科伶一院微生物研究所 c-Jun, 349 引物名称 产物大小 ((bp) 引 物 M 序 5一 A,M ACrAlT(L;AAATGCAC- 3 卜ff熟 〔 5 “- ATR;G叮[,RTACATAC几T.-3 -GGA(Y3;GGAAAT0GMOLT(;A[A ITAAGGM A-3 p--acm, CGR ATA[ICCIL;CrR;CR:A7rAf4RR:(- 4.链霉亲和素 (SP)简化免疫组化试剂盒:美国IABVISION公司生产 (购自北京岳 泰科技有限公司)。 二、免疫组化采用AI(方法 1.石蜡切片常规脱蜡至水; 2.PBS洗3次，每次3分钟; 3.3%氏姚纯甲醇溶液封闭30分钟，室温; 4.PBS洗3次。每次3分钟; 5.拘椽酸钠缓冲液 (PH6.0)中处理 10分钟，951C; 6.PBS洗3次，每次3分钟; ，.1%马血清封闭，371v，20分钟; 8 第一抗体 (鼠或免抗入)4X,，过夜; 9.PBS洗3次，每次 l0分钟; 10.生物素化的二抗 (1200),37V,30分钟; 11.PBS洗3次，每次5分钟; 12.加HRP标记的Stmptavidin(1:200)40分钟，371v; 13.PBS洗3次，每次5