PI3K、DGAT2、PKCε在大鼠非酒精性脂肪性肝病发病机制的作用研讨.pdfVIP

病发病 ·········1 ·········l ·········4 ·········8 ········lO ········22 1．6 讨论……···············…·············································32 1．7 结论……………………………………………………………47 1．8 参考文献………………………………………………………48 1．9 英汉缩略词对照表……………………………………………56 2 致谢……………………………………………………………57 3 PI．3 K在非酒精性脂肪性肝病发病中作用的研究进展 (综述)………………………………………………………58 4 独创性声明及版权授权书……………………………………73 ㈨㈣洲1111l删l 7848 Y1 PI．3K、DGAT2、PKC．￡在大鼠非酒精性脂肪性肝病 发病机制的作用研究 摘 要 liver 目的：非酒精性脂肪性肝病(non．alcoh01ic觚y 是指除外酒精和其他明确的肝损伤因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂 肪变为主要特征的临床病理综合征，包括单纯性脂肪性肝病以及由其演变 的脂肪性肝炎和肝硬化【m】；目前，NAFLD的具体发病机制并不是十分清 楚，是一种代谢应激性肝损伤，其与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关【3-51。 本实验旨在通过改良高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型，通过时 l【inase Acyltransferase一2，DGAT2)、蛋白激酶CQroteinC，PKC)的亚型PI∞_￡ 在脂肪肝的表达量的变化，从而进一步探索NAFLD的发病机制。方法： 机分为2组，设立4、8、12周高脂喂养模型组(H组)，并设立同时相正常 喂养组(N组)作为对照，每组8只。正常饮食组给予基础饲料(泸州医院实验 动物中心提供)，模型组给予高脂饮食(即制备的改良高脂饲料：胆固醇含2 ％，胆酸钠含O．5％，丙硫氧嘧啶含O．2％，蔗糖含5％，猪油含10％，基 末时分别处死对照组及模型组大鼠各8只，心脏采血，测量大鼠的血清转 脂变进展；然后迅速取出肝脏称肝湿重，计算肝指数：肝湿质量／体质量 ×100％。取肝组织标本，制备石蜡切片，行苏木精．伊红(HE)染色观察肝 组织光镜下的病理改变，并观察肝脏脂肪变程度；免疫组织化学法检测 PKC．￡在肝组织中的表达情况；实时荧光定量PCR法(real．time PCR)检测肝脏PI．3K砌[蝌A以及DGAT2mRNA的表达。计量资料用均数 士标准差(万士^妨)表示，采用t检验，组间比较采用方差分析，方差齐者 采用单因素方差分析，方差不齐者采用H检验，