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甲睾酮在四种反应体系中0坦位
脱氢反应的研究
路福平 张艺 刘洪岩
天津科技大学生物工程学院 天津中盐制盐工程技术研究院
【摘要】霹曲 毙较筒单繁枵菌在薅糟夏应体系中摧化王7理一甲基一17§一羟基雄甾一4一烯一3一礁
(甲睾酮)斑成去氢甲睾酮的转化率。方法将甲睾酮投入四种反应体系中,即普通直接转仡、双液相转
化、原生质体转化和破碎细胞转化,通过高效液相法测定转化率。结果不同体系申甲睾酮C】.,2位脱氢转
纯率壹高剜低依次是普通直接转我、双液糖转讫、破碎舞胞转俄和原生鬟体转化,转化率分别舞59。翳、
35.2%、11.7鬈和8.7j|;。
【关键词】黄单葶籽菌;甲睾溺;01。2位脱氢;反应律系
微生物对甾体的转化作用不周于微生物的次 用于睾丸素缺乏症的补充治疗,也可用予子宫功能
缀代谢,它憝通过微生物体内的脱氢酶和电子转移 性密盘、再生障碍性贫血等,其Cl,2经脱氢产物去
酶系而发挥作用的。脱氢酶是胞内酶,亦是诱导酶。
进蛋自葳合成,掷制蛋壹质黪生,使食欲增进,胍
在钓世纪粥年代,3.甾黧Cl,2位脱氢酶(瑟国珏)
E.C.1.3.994融从多种细菌中分离成功,这种脱氢酶肉增长,体重增加,临床用于慢性消化性疾病,骨
质疏松疫等,它与甲睾酮相比较,具有同化作用强,
是~种分子爨为56.62Kda的单~蛋白。其中以简
单节杆菌的Cl,2位脱氢效采最好。 雄性样作雳小的特点,丽置还可以俸为其它甾体激
素的原料中间体。
甲睾酮(Methyltestosterone)作为雄激素类药,
6*
△1脱氢
——————————-——-—————◆
简单节杆菌
O
蘑1楚单节抒骜馕纯甲睾弱囊畿去氢甲睾酾
·398·
2007年全国发酵行业高峰论坛
目前对于甲睾酮在不同反应体系中的转化研 加入4u/ml的青霉素溶液,8h后取培养液10ml,
究在国内外尚属空白。本文比较了普通直接转化法
和双液相转化法2种体系的转化率,并研究了细胞 洗涤两次,悬浮于6mlSMM中,加入溶菌酶处理,
壁与细胞膜对生物转化的影响,进行了原生质体转 镜检观察,当菌杆状多变为球状时离心,SMM洗
化与破碎细胞转化试验。 涤两次,重悬于该高渗液中,即得原生质体悬浮液,
1、材料和方法 投加0.5%底物和4%甲醇,转化条件同1.3.2。
1.1菌种 1.6破碎细胞的转化
简单节杆菌(Arthrobacter 1.94
simplex)AS 参考文献【9,10]操作。取生长至对数期末期的
为天津科技大学实验室保藏菌种。
1.2培养基 用1/15mol/L
ph7.0的PBS缓冲液洗涤两次,重悬
1.2.1斜面培养基(%)
葡萄糖1,酵母膏1, 于6ml该缓冲液中,在冰浴条件下超声波处理菌悬
琼脂条2,PH7.0。
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