白血病治疗研讨.pdf

白血病治疗研究 研究生 程听 导师 熊冬生教授 学科专业 肿瘤药理学 入学时间 2005年9月 所在院所 血液学研究所 二零一零年五月 目 录 第一部分觚ti—cD20Fab．L删基因工程抗体的构建、表达及活性研究 摘要………………………………………………………．3 前言………………………………………………………．5 实验材料……………………………………………………7 实验方法……………………………………………………8 结果……………………………………………………．24 讨论……………………………………………………．40 结论……………………………………………………．43 参考文献…………………………………………………．．43 第二部分PHII一7逆转耐药的作用机制的研究 摘要………………………………………………………48 前言………………………………………………………50 实验材料…………………………………………………．．53 实验方法…………………………………………………．．54 实验结果…………………………………………………．．59 讨论……………………………………………………．62 结论……………………………………………………．65 参考文献…………………………………………………．．65 第三部分基于cK8和BCllP多因素耐药机制的多靶点治疗 摘要………………………………………………………69 前言………………………………………………………7l 实验材料…………………………………………………．．73 实验方法…………………………………………………．．73 实验结果…………………………………………………．．75 讨论……………………………………………………79 结论……………………………………………………．83 参考文献…………………………………………………．．84 2 第一部分ant 的构建、表达及活性研究 摘要：力达霉素是烯乙二炔家族的一个新成员，主要由辅基蛋白和发色团两部分 组成，可以拆分和重组。目前，力达霉素已经进入2期临床。本实验，利用DNA重 组和分子重建的方法构建了一个以CD20为靶点、力达霉素为弹头药物的重组基因 工程抗体。体外，抗CD20Fab—LDM基因工程抗体对CD20+的B细胞淋巴瘤有很强的肿 瘤杀伤活性，IC50仅为80一90pM。体内，无论是早期还是晚期CD20+的B细胞淋巴瘤 移植瘤模型，抗CD20Fab—LDM的肿瘤抑制率均在90％左右，远远强于单独的力达霉 素。尤其值得一提的是，抗CD20Fab—LDM对病人原代肿瘤细胞，尤其是美罗华耐药 的病人肿瘤细胞同样有效。因此，我们认为抗CD20Fab—LDM基因工程抗体提供了一 种治疗B细胞淋巴瘤特别是美罗华耐药的B细胞淋巴瘤的新方法。利用DNA重组和分 子重建也为制作新型抗肿瘤药物提供了一个很好的技术平台。 关键词：cD20，力达霉素，基因工程抗体，B细胞淋巴瘤。 3 Abstract anewmember Abs仃act：Lid锄yciIl(LD岣is 廿lalcanbe consistsofalabileactiVe s印arated锄d似妁nStituted．It enedi)，Ile a bound