磷脂物质在代谢调控发酵方面的应用研究.pdfVIP

磷脂物质在微生物代谢调控发酵方面的应用 1 张 照 明 ，胡 佩 ，牟月新，袁利明，王广博 （东营市源聚生物制品有限公司，山东东营 257200） 摘要：磷脂类物质在改善微生物细胞膜的膜透性有一定的作用。本文总结了其在微生物代谢调控发酵方面的 应用情况，重点介绍了在发酵法透明质酸产品生产方面的研究成果。 关键词：磷脂；细胞膜；膜透性；代谢调控；透明质酸 发酵过程是指借助微生物的代谢活动大量积累目标产物的生产过程。长期以来，由于人 们对某些代谢途径的调控系统有了更深入的研究，可以采用一定的技术措施，利用微生物的 代谢规律，来改变细胞的调控系统，有效地使代谢目的产物大量积累，以提高终产物水平。 微生物次级代谢产物通常是在菌体对数生长后期或稳定期、以初级代谢产物为前体合成的分 子结构复杂的化合物。如：抗生素、酶制剂、微生物多糖、色素、毒素等等。抗生素的发现 把次级代谢的研究推向了20 世纪生物科学的前台。次级代谢的调节主要有：初级代谢对次级 代谢的调节；碳氮代谢物的调节作用；诱导作用及产物的反馈抑制；无机磷的反馈调节；溶 解氧和金属离子的影响；此外还有其他因子的调节，例如：ATP 调节、改善细胞膜的通透性、 诱导调节等。在发酵过程中，能否将代谢终产物全部分泌或转出胞外，是发酵生产成功的关 键。这里着重介绍通过添加有效成分改善微生物细胞膜的膜透性，促进代谢产物的大量生成， 来提高终产物产量方面的应用。 通过研究发现磷脂类物质具有表面活性和生物活性，可改善细胞膜的通透性。磷脂是构 成细胞膜的主要成分。添加磷脂类物质对微生物次级代谢调控的研究，不仅有利于深入了解 复杂化合物生物合成与微生物生理分化调节的分子机制，而且为生产实践提供理论指导，必 将产生更大的经济效益和社会效益。 1 磷脂的结构性质 磷脂（包括微生物细胞膜上的磷脂）结构为： O ‖ O CH2 O— C— R1 ‖ R — C—O— C— H O 2 ‖ + CH —O— P— O— X 2 ‖ O- 其中R 通常为饱和脂肪酸基，R 为不饱和脂肪酸，X 可以是胆碱、乙醇胺、丝氨酸等。 1 2 通过大量的研究和实验得到，我们用化学方法合成的磷脂类物质，与微生物细胞膜上的 1 磷脂结构类似但不相同，也具有表面活性和生物活性，可改善细胞膜的通透性。与其它表面 活性剂相比，化学法合成的磷脂具有如下优点： 1、对微生物细胞膜无伤害（无毒性），不改变微生物的代谢途径。 2、使用量范围较宽，在 0.03～0.5%范围都有明显的效果。不象其它表面活性剂，尽管 也有改善细胞膜通透性的作用，但使用剂量很难控制，稍稍多加，就可能导致菌种中毒。 3、与天然磷脂的区别仅仅在于R 基因的不同。化学法合成的磷脂类物质 R 变将成磷酸 1 1 根。这样就改变了它的溶解性，使它易溶解于水。（天然磷脂不溶于水，不易被微生物吸收利 用） 2 磷脂类物质在中性蛋白酶发酵方面的应用 2.1 菌种 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） HD401 2.2 发酵条件 培养基（%）：玉米粉5.0、 豆饼粉3.0、 麸皮4.0、 Na2HPO40.4、 KH2PO40.03； 自 然PH 、发酵