空间诱变处理苜蓿的细胞学效应研讨.pdfVIP

132 航天育种高层论坛论文选编 空间诱变处理苜蓿的细胞学效应研究 王长山1徐香玲1张月学2唐凤兰2 (1．哈尔滨师范大学哈尔滨 150080；2．黑龙江省农业科学院哈尔滨 150086) 摘 要 本试验利用返回式卫星搭载2个苜蓿品种的干种子，进行空间诱变处理， 通过观察染色体的异常研究其细胞学效应。结果表明，空间环境能促进苜蓿细胞的 有丝分裂活动，对有丝分裂细胞染色体具有明显的致畸作用，可诱发染色体结构变 异。经空间飞行的苜蓿有丝分裂细胞染色体畸变细胞率显著高于对照组。 关键词 苜蓿 空间诱变 细胞学效应 染色体畸变 在诱变育种方法探索中，空间诱变以其辐射损伤轻，诱变效率高，成为诱变改良作物的 新型高效诱变因素之一。多年来，随着人类对空间资源的开发，利用高空气球和返回式卫星 搭载植物种子，进行空间诱变处理，已发展成一种新的诱变方法、El渐被人们接受加以利 用。研究表明，以高真空、微重力和强辐射为特征的太空环境，能增加染色体畸变频率…， 引起同工酶酶谱变化及形态学性状变异幢“j，更在分子水平对DNA结构产生影响”q1。苜 蓿是一种优良的牧草种质资源，有“牧草之王”的美称。本研究通过第18颗返回式卫星搭 载2个苜蓿品种的干种子，进行空间诱变处理，研究其细胞学效应，并与1射线和对照作比 较，探讨其间差异，以期为进一步开展牧草的诱变育种提供理论依据。 1材料与方法 1．1材料 龙牧803紫花苜蓿肇东苜蓿干种子 1．2方法空间处理 每品种各取300粒干种子，于2003年11月3Et第18颗返回式卫星搭载，近地点 El返回。以未 经搭载的种子作对照(CK)。 2细胞学观察 将诱变的种子置于23±1℃恒温箱中浸种36小时，然后分别将各样品置于富含水分的 铺滤纸的培养皿中，在25。C恒温光照培养箱里培养。至根尖长1．0—1．5cm时剪根，卡诺 航天育种高层论坛论文选编 i33 浴，解离十分钟，醋酸洋红染色，改良压片法制片，进行显微摄影，液态氮冷冻，加拿大树 脂封片，制成永久装片，每种处理显微观察50个左右根尖，每个根尖随机观察100—150个 左右细胞，计数根尖分生组织内携有可见染色体结构变异及有丝分裂行为异常的细胞数，计 算染色体畸变细胞率及有丝分裂指数(M1)。 3结果与分析 3．1 空间诱变对有丝分裂的影响 经卫星搭载的2个苜蓿品种的种子，其根尖细胞有丝分裂指数(MI)分别为14．82和 分裂活动。 表1 空间环境对苜蓿的细胞学效应 3．2空间诱变对有丝分裂微核的影响 在空间诱变材料中我们观察到大量的微核，苜蓿的染色体较小，微核在中、后、末期往 往与粘连、断片、落后、桥等并存，通过统计分析可以看出，空间诱变的染色体畸变类型以 、 微核为主。 微核鉴别标准：与主核完全分离，圆形或椭圆形，边缘光滑，嗜色性与主核基本一致。 凡未与主核分离或大于主核1／3以上者均不计数。此外，也不计数根冠细胞。 3．3空间诱变对有丝分裂细胞染色体的影响 苜蓿种子经卫星搭载后，在有丝分裂细胞内可诱发各类染色体结构变异(表2)。由表 1可见，2个供试品种经空间诱变的染色体畸变细胞率均明显高于相应的对照，出现了微核、 染色体断片、落后染色体、染色体桥等多种变异类型(表2)。空间诱变的苜蓿染色体畸变 类型均以微核为主。 表2 空间环境对苜蓿根尖细胞染色体畸变效应 注：括号内数据为百分数 航天育种高层论坛论文选编 据报道，辐射和射线均能引起植物染色体各种类型畸变和细胞分裂的异常阳“11，苜蓿 干种子在空间诱变条件作用下，有丝分裂细胞染色体发生各种可见变异，畸变类型如下：在 中期，出现染色体断片(图版4)、染色体粘连(图版7)等；在后末期出现染色体桥(图 版8、9)，它是染色体断裂一融合导致产生的，双着丝点的染色体桥在后末期常见；在这个 时期还见到个别游离染色体(图版12)。染色体落后出现于后期(图版5、6)，表现为