利用正交设计法对叉叶苏铁精选.pdfVIP

第! 卷# 第$ 期# # # # # # # # # # # # # 植# # # 物# # # 研# # # 究 !%% 年# 月 ’()* !# +(* $# # # # # # # # # # # # ,-../01+ 23 ,204+154. 6/7/4658 9:; ，# !%% 利用正交设计法对叉叶苏铁1776@J56 反应体系的优化研究 ! ! $ K K 莫鹏巧# 黄玉源 # 钟晓青 # 刘广林 # 李正文 # 农保选 （* 广西大学农学院，南宁# $%%%K ） （ ! * 仲恺农业技术学院生命科学学院，广州# %!! ） （ $* 中山大学生命科学学院，广州# %!= ） （K * 广西农业科学院，南宁# $%%%= ） 摘# 要# 比较504, 法和7L7 法提取叉叶苏铁（!#$% ’#()*’+,’’ ）的总L+4 ，发现504, 法是提取 叉叶苏铁总L+4 的较好方法；对叉叶苏铁1776@J56 反应体系中的K 个主要因素M+0JN ，-$. L+4 聚合酶，引物及9O! P 进行最优条件筛选；采用单因素法探讨L+4 模板量、退火温度和循环次数的 最佳反应条件，建立了适合于叉叶苏铁的最佳1776@J56 反应体系（!% !. 体系）： Q ,RSSTU ，= HO L+4 模板，M+0JN !% !A() ·. I ，-$. 酶* %- ，引物% * ! !A() ·. I ，9O! P ! * AA() ·. I ，反应程 序为：?K V 预变性 ABH ，?K V 变性 ABH ，!V 退火 ABH ，=!V 延伸! ABH ，循环K% 次，=!V 延伸% ABH ，K V 保存。本研究结果为苏铁纲植物的分子生物学和分子系统学研究提供理论参考。 关键词# 叉叶苏铁；1776@J56 ；正交设计；单因子试验 中图分类号：W?K? ；W?K @$$# # 文献标志码：4# # 文章编号：=$ I %! （!%% ）%$ I %$%K I % !#$%’()*+# ,- ! #$% ’#()*’+,’’ .//01230 45#’)$ 3,+6’#’,+ 7’#( 48#(,9,+$ 45#’)’:$#’,+ ;*#(,6 ! ! $ K K 92 JTHO@WB:( # 8-4+X YR@YR:H # Z82+X [B:(@WBHO # .1- XR:HO@.BH # .1 ZETHO@\TH # +2+X ,:(@[R:H （* 4OUBGR)]RU:) 5())TOT ，XR:HODB -HB^TUNB]; ，+:HHBHO# $%%%K ） ! * 5())TOT (S .BST 7GBTHGTN ，ZE(HO_:B -HB^TUNB]; 4OUBGR)]RUT :HM 0TGEH()(O; ，XR:HO‘E(R# %!! ） （ （$* 7GE(()