流感嗜血杆菌的实验活动生物危害评估报告.docVIP

流感嗜血杆菌的生物危害评估报告 一、细菌的传播与致病 嗜血杆菌是只有在含有血或血制品及其因子的营养条件下才能生长发育的一群细菌。目前发现的嗜血杆菌有16种，可致人类疾病的至少有8种，其中最具代表性的为Ｈｉ。根据荚膜成分的不同，Ｈｉ又分为ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ6种菌型，其中又以ｂ型流感嗜血杆菌（Ｈｉｂ）最容易引起侵袭性疾病。 流感嗜血杆菌主要寄生于人的鼻、咽、眼及阴道黏膜中，常与正常菌群共生，人是唯一的传染源和带菌者，病人和鼻咽带菌者为传染源。健康人鼻咽部带菌率可高达60～80％。带菌可持续数日或数月。 Ｈｉｂ多寄居在鼻咽部黏膜，通过空气飞沫和密切接触在人与人之间传播，新生儿可通过母亲的产道感染。流感嗜血杆菌只引起人类感染，对动物无致病性。同样，寄居于禽类、猪、犬的嗜血杆菌也不感染人类。有研究表明，人群对流感嗜血杆菌普遍易感。新生儿由母体抗体被动免疫，3个月～3岁儿童的抗体水平最低，对该菌最易感，Ｈｉ在健康学龄前儿童的带菌率为10.9％～37.9％，学龄儿童最高可达20.9％；Ｈｉｂ在学龄前儿童带菌率为5.4％～6.9％。成人可为无症状带菌者，其发病多有免疫缺陷。 Ｈｉ带菌率与季节有关，感染多散发，一年四季皆可发病，但多从秋季开始增加，冬季达高峰。Ｈｉｂ通过飞沫进入人的呼吸道，侵入血液繁殖，可扩散至人体多个器官，引起组织、器官的侵袭性感染。流感嗜血杆菌是幼儿脑膜炎,菌血症,脓毒性关节炎,肺炎,气管支气管炎,中耳炎,结膜炎,鼻窦炎和急性会厌炎的主要病原菌，这些感染和心内膜炎也可发生于成人但比较少见。 国内的临床调查显示，儿童社区获得性肺炎中，Ｈｉ占29.0％。Ｈｉ所致的感染以呼吸道感染居多，其中肺炎多通过飞沫传播。流感病毒或葡萄球菌感染的患者易并发Ｈｉ肺炎，起病较慢，常有痉挛性咳嗽，全身症状重，中毒症状明显，白细胞明显增高，有时伴淋巴细胞的相对或绝对升高。小婴儿Ｈｉｂ肺炎常并发脓胸、脑膜炎及化脓性关节炎，易后遗支气管扩张症。Ｈｉｂ脑膜炎在儿童化脓性脑膜炎中占28.9％～51.7％。在欧美国家，Ｈｉｂ是儿童未使用疫苗前化脓性脑膜炎中居首位的病原菌。化脓性脑膜炎较常见，但危害大，其发病率仅次于流脑。多数患者具有明显的前驱症状，常见流涕、咳嗽等，经数日或1～2周方出现脑膜刺激征，以冬春两季多发。10％的儿童有单侧或双侧性耳聋。其他并发症如学习能力差、精神发育迟缓、颅神经麻痹、瘫痪等通常为暂时性的，有望治愈。Ｈｉｂ感染常致会厌炎，表现为会厌部红肿、吞咽不适，有时发生呼吸困难。在中国发病率较低，但病死率可高达7％～8％。化脓性中耳炎等在国内相对少见。 二、细菌的生物学特性 流感嗜血杆菌（Hemophilus influenzae，Ｈｉ）简称流感杆菌，又名费佛氏杆菌（Pfeiffer s bacillus），为革兰氏阴性短小杆菌，大小为0.8～1.5ｍｍ×0.3～0.4ｍｍ，两端钝圆。从病灶中新分离的菌株多呈球杆状或双球状，有时可呈短链。在陈旧培养物中呈多形性，有长杆状或丝状体。本菌无动力、无芽孢，粘液型菌株有荚膜。 Ｈｉｂ为需氧菌，培养较困难，由于该菌氧化还原酶系统不完善，生长时需要“Ｘ”和“Ｖ”两种生长辅助因子。“Ｘ”因子存在于血红蛋白中，可耐高温。“Ｖ”因子存在血液中，耐热性较差。在血液中“Ｖ”因子处于被抑制状态，加热75～100℃，5～10min，抑制物被破坏后才被18～24小时，菌落微小，无色，透明似露珠，48小时后形成灰白色较大的菌落、圆形、透明。如以Ｈｉｂ和金黄色葡萄球菌在同一巧克力琼脂平皿上培养，由于葡萄球菌能合成较多的“Ｖ”因子，并弥散到培养基里，可促进Ｈｉｂ的生长，故在葡萄球菌菌落周围生长的Ｈｉｂ的菌落较大，距离葡萄球菌菌落越远的Ｈｉｂ的菌落越小。此称为“卫星现象”。这一特点有助于对此菌的鉴定。 由于有些标本如痰，有大量杂菌生长，对Ｈｉｂ的分离培养影响较大，在巧克力琼脂平皿内加入该菌可耐受的抗生素（每毫升巧克力琼脂内加万古霉素50ｍｇ，杆菌肽30ｍｇ，氯林可霉素1ｍｇ）可提高本菌的分离率。 根据荚膜多糖抗原成分的不同，应用型特异性免疫血清作荚膜肿胀试验或其它血清学试验，可以将Ｈｉｂ分成6个（ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ）血清型。 　　其中ｂ型对婴幼儿的致病性最强，且最多见，ｆ型次之。 三、细菌的实验室检查及其它检查 虽然有些病例可根据病史和临床表现疑为流感嗜血杆菌感染，但必须通过实验检查方可确诊。 1.血常规 此杆菌感染时病人血液白细胞大多增高，通常为15×109/L～30×10９/L，重症患者的白细胞总数可减少。 2.细菌培养 可采取病人脑脊液、血液和穿刺抽取液进行细菌培养予以确诊。 3.采用对流免疫电泳，胶乳凝集，协同凝集和ELISA等方法检查脑脊液、血液和浓缩的尿液中Ｈｉｂ的特异抗原磷酸聚核糖基