外源ABA影响生物膜特性的两个证据.pdfVIP

维普资讯 科 学 通 报 第 3B卷 第 2●期 CHINESESCIENCEBULLETIN 1993年 I2月 外源 ABA影响生物膜特性的两个证据 2乙 一2 州 关麓调^队、苎!_兰兰璺叶绿件电濠率、^T“。 脚 哦 生 脱落酸 (abscisicacid，ABA)具有两类区别明显的作用方式，即通过影响棱酸或蛋 白质 的代谢起慢反应，或者与膜相互作用而起快反应，其作用的分子模式是植物激素以及逆境生理 研究的中心 问题之一． 自 l984年 Hornberg和 Weilerm 报道 了 ABA 结合蛋 白以来 ，成功 地重复这一工作的报道并不多． 另一方面，Lea等 和 Stillwell等的系列研究工作 却证 明 ABA 可增加磷酯或糖酯脂质体对 阴、阳离子及 中性溶质的透过，增加异相酯 膜 泡 的 聚 集 (aggregation)和融合 (fusion)，并认为 ABA作用于膜异相脂之界面或缺损 区域导致膜脂分 子缔合方式改变． 由于此种膜不合蛋白质，因而 Stillwell认为是否存在 ABA 受体值得怀 疑．问题在于 Stillwell等所用的ABA浓度高于其生理浓度 (达 0．5mmo1]L)，而且缺少 ABA 影响生物膜生物物理结构的证据，本文结合量热法和测定 ATPase活性 ，初步证明ABA可降 低线粒体膜相变温度，并用细胞 电泳法证明A队 对叶绿体表面 电荷有影响． 1材料和方法 1．1 线救体的分离与相变温度的测定 线粒体 由28(3暗培养的玉米 (z4mayL_)胚芽鞘中分离，方法参照文献 【61略加修改， 即在清洗介质中加入 38~／mol／L (4-)ABA(Fluka)作为处理，沉淀的线粒 体 约 10mg置 Dupont1090热分析仪 的密封样品盒 中，进行差示扫 描量 热 (di~ferential~canningcalorJ— meter，DSC)，量热条件同文献[7】，微机终端给出DSC图，各样品均经 2次重复． 线粒体 Na KATPase活性测定同文献 [6]，在 5—4O℃ 每间隔 3℃ 测定酶活性，处理的在反应介质 中亦加入 38 u．mol／LABA．以酶活性的对数对 ×1000作图，井计算活化能． 』 1．2 叶绿体的分离和电泳率的鞠定 按文献 【81的方法从不同 日龄的菜豆 (Phasvolusuulgaris)叶中分离叶绿体井测定其 电 泳率，以在清洗与悬浮介质中加入 38a／a-aol／LA队 作为处理，调叶绿体浓度 5000个 ／m!， ZY904A型Zeta电泳仪(上海地质仪器厂)测定 10个叶绿体在静止层的泳动速率，井计算 电 泳率．另从15日龄叶片提取叶绿体，测定4qC暗保存期间电泳率的变化及ABA 的影响． 1995—05—26收稿，1993-07-0I收修改稿． 现在南京农业大学农学系袭读博士学位． 维普资讯 科 学 通 报 第 58卷 2 结 果 与 讨 论 2．1 ABA 对线粒体DSC 图谱和线粒体 Ha一K ATP Arrhenlus圉的影响 热分析仪微机终端给出的线粒体 DSC图谱 (图 卜1)有两个吸热峰，峰 a的峰顶温度为 -- 0．7~C，热焓很大，显然是冰融化时的吸热 峰，峰 b热冶非常小 (只有将纵坐标定为 1