溶血和带血细胞标本对HBsAg结果的影响研究.docVIP

精品论文 参考文献 溶血和带血细胞标本对HBsAg结果的影响研究 柳富成（宁夏固原市人民医院756000） 【摘要】 目的：探讨溶血标本对HBsAg结果的影响并提出针对性预防措施。方法：选择我院30例HBsAg（+）和30例HBsAg（—）临床资料作为研究对象，分别记为观察组及对照组，两组标本均进行常规检测及溶血后检测，观察溶血对HBsAg检测结果的影响。结果：观察组两次检测均为（+），对照组非溶血检测为（—），溶血检测HBsAg（+）10例，HBsAg（—）20例。结论：标本溶血后对HBsAg（+）检测结果无影响，但是会导致HBsAg（—）出现假阳性，溶血标本不宜进行HBsAg检测。 【关键词】标本检测；溶血；乙肝表面抗原；ELISA 【中图分类号】R446.1【文献标识码】B【文章编号】1007-8231（2011）11-1877-01 乙肝表面抗原（HBsAg）检测是诊断乙型肝炎的主要指标，随着检验技术的不断发展酶联免疫法因其简便，灵敏???高，不需要特殊设备，被广泛应用，虽然检测时标本要求不能溶血，但是在实际工作中［1]，会遇到各种原因造成标本溶血，溶血标本中非特异性物质对试验结果会造成一定的影响。本文介绍溶血标本对HBsAg检测结果的影响。 1资料和方法 1.1一般资料 选择我院30例HBsAg（+）和30例HBsAg（—）临床资料作为研究对象，分别记为观察组及对照组，观察组男性19例，女性11例，年龄在19~56岁之间，平均35.5plusmn;4.4岁；对照组男性20例，女性10例，年龄在20~54岁之间，平均34.4plusmn;4.8岁。 1.2方法 酶联免疫试剂盒由浙江艾康生物技术有限公司提供，制备溶血标本，受检血清置于低温冰箱（—40℃）冷冻20min，取出融化以3000r/min离心10min，分离溶血血清。反应条每孔加入待检测标本50mu;l，设阴阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照或阳性对照各1滴，设置空白对照1孔，每孔加入酶结合物1滴，空白对照除外，摇匀，封板，置于37℃避光孵化30min，弃孔内液体，洗板5次晾干，每孔加显色剂A、B各1低，置于37℃避光孵育15min，目测比色，肉眼观察无色为HBsAg（—），显蓝色为HBsAg（+）［2]。 1.3统计学处理 使用SPSS13．0对各项资料进行统计分析，各项参数以均值plusmn;标准差(xplusmn;s)表示，使用X2,t检验，Plt;0．05为差异有统计学意义。 2结果 两组标本检测结果见表1 表1两组标本检测结果 观察组两次检测均为（+），对照组非溶血检测为（-），溶血检测HBsAg（+）10例，HBsAg（-）20例。 3讨论 用ELISA检测HBsAg有快速简便、特异性强、灵敏度高等优点，是各级实验室常用的试验方法，溶血标本应用ELISA法检测易产生假阳性，其原因可能为溶血血清中含有过氧化酶物质，红细胞或血红蛋白中亚铁血红素，HBsAg产生假阳性，溶血的原因较多［3]，主要是体外溶血及体内溶血两种，体内溶血是物理因素造成的，如人工心脏瓣膜或大血管手术后，生物因素如恶性疟疾、药物毒性反应引起的，体外溶血是代谢性因素如遗传性疾病引起血细胞脆性增加、机械性破坏、冷冻、血液接触表面活性剂等［4]。此外采集过程中注射器或容器不干燥、不清洁，淤血时间过久，抽血消毒时消毒剂未擦干就采集血液标本，出血速度过快等。 在本组患者中HBsAg（-）溶血患者出现10例假阳性，其原因可能为溶血血清中含有过氧化物酶物质，血红蛋白亚铁血红素、红细胞与聚乙烯孔被抗原或抗体结合［5]，在洗涤过程中不能完全被洗涤，谷胱甘肽等过氧化物酶有明显相关性，谷胱甘肽广泛存在于人体组织及细胞中，发生溶血时，过氧化物酶进入血浆，大量吸附在细胞碎片及纤维蛋白上［6]，增加了洗涤的难度，可使过氧化氢释放出原生态氧，催化底物，甲苯胺生产可溶性物质显色，易出现假阳性。检测一般采用一步检测法，往往难以洗脱残留的过氧化物酶催化底物四甲基联苯胺显蓝色，并产生假阳性，有研究表明对标本进行二部法检测［7]，首先将血清清洗掉，残留的过氧化物酶含量极微，温育过程中不会与酶结合物所含的抗体、抗原结合，经过两次洗涤，降低了残留的可能性，保证检测结果准确。溶血标本在临床检验中一般不进行检测，要求退回重新采集标本，增加了患者的痛苦，延长了检验时间。溶血标本能使未感染乙型肝炎病毒的健康患者出现假阳性，增加了临床诊断的困难［8]，同时也给患者带来很大的心理压力。为避免溶血对HBsAg检测结