基因工程和蛋白质工程-高中三年级生物课件.ppt

* 1、基因工程又叫做 ________ 或__________。 基因工程 基因拼接技术 DNA重组技术 2、基本工具： “分子手术刀” “分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体 3、基本操作步骤： 运载体 DNA连接酶 限制性内切酶 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心） 3、将目的基因导入受体细胞（转化） 4、目的基因的检测与鉴定 基础回顾 十字绣/ 十字绣之家http://www.szxclub十字绣/ 十字绣之家/ 十字绣图案大全/picture/十字绣绣法/xiufa/十字绣品牌/pinpai/.com/ 专题1 基因工程 1、了解基因工程的诞生过程 2、理解基因工程的原理和技术 3、理解基因工程在工农业、 医药卫生等的应用 学习目标 基 因 工 程 黏性末端 黏性末端 1、限制性核酸内切酶 一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割DNA分子） 来源：主要从原核细胞分离 作用： 作用结果： EcoRI 重难点剖析 基因工程的“专用工具” 平未端（SmaI）及粘性未端（EcoRI） 1、种类： 2、作用部位： E·coli DNA连接酶（黏性末端） T4 DNA连接酶 （黏性末端和平末端） 磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 DNA连接酶——“分子缝合针” 基因工程的“专用工具” 运载体：常用质粒、 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 质粒特点： 1、细菌染色体外双链环状DNA分子 2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在 3、有一个或多个限制酶切点 4、有特殊的遗传标记基因 注意：真正用作运载体的质粒都 是人工改造过的。 （二）基因表达载体构建 1、基因表达载体由________、________ ________、______四部分组成。 目的基因 启动子 标记基因 终止子 2、启动子作用： 3、标记基因的作用： RNA聚合酶识别和结合的位点 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 筛选出含目的基因的细胞 质粒 DNA分子 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 限制酶处理 同一种 过程: 导入植物 细胞： （三）将目的基因导入受体细胞 导入动物 细胞： 导入微生物细胞： 受体细胞 导入方法 体细胞 受精卵 受精卵 显微注射法 Ca2＋处理法 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 目的基因是否插入转基 因生物染色体的DNA： （四）目的基因的检测与鉴定 目的基因是否表达： 目的基因是否转录： 方法: DNA分子杂交 方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原抗体杂交 鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 检测— DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 1、抗虫转基因植物 方法： 从某些生物中分离出具有杀虫活性的 基因，将其导入农作物中，使其具有 抗虫性 Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集 素基因等 （一）植物基因工程硕果累累 2、抗病转基因生物 目的基因包括： 病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、抗真菌转基因植物中的有几丁质酶基因和抗毒素合成基因 3、抗逆转基因作物 4、利用转基因改良植物的品质方法： 基 因 工 程 的 应 用 用转基因动物生产药物---动物乳腺生物反应器 获取目的基因 （药用蛋白基因） 构建基因表达载体 （在药用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的启动子） 显微注射导入哺乳动物受精卵中 形成早期胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达） （二）动物基因工程前景广阔 用转基因动物作器官移植的供体 供体动物： 存在的难题： 解决方法： 猪 免疫排斥 将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。 （三）、基因工程药品异军突起工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。我国已生产的产品： 白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等 （四）基因诊断与基因治疗 　基因诊断：用放射性同位素等标记的“DNA探针